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淫羊藿苷对香烟烟雾提取物诱导上皮细胞炎症的保护作用
目的:探讨淫羊藿苷对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的上皮细胞炎症的影响.方法:CSE刺激SD乳鼠肺泡上皮细胞(ATⅡ)建立细胞模型.细胞分6组:对照组、CSE组、PDTC[核因子KappaB(NF-κB)抑制剂]组、淫羊藿苷低(40μ g/mL)、中(80μg/mL)和高(160μ g/mL)剂量组.改良巴氏染色和电镜鉴定ATⅡ细胞;CCK-8法检测药物对细胞增殖的影响;ELISA法检测细胞上清液中细胞因子含量;蛋白质印迹法检测I Kappa B-α(IκB-α)和P-p65磷酸化水平;凝胶迁移实验(EMSA)检测NF-κB的DNA结合活力.结果:分离培养的细胞巴氏染色阳性;淫羊藿苷各组均未显示出细胞毒性,CSE对ATⅡ细胞呈现出时间和浓度依赖性抑制;CSE组细胞上清液中白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-6 (IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)较对照组显著性升高(P<0.05),IL-10显著性降低(P<0.05),淫羊藿苷组随着剂量增高IL-8、IL-6、TNF-α表达逐渐降低,IL-10表达增加.经CSE诱导后,P-p65蛋白表达较对照组增加(P<0.05),IκB-α则减少(P<0.05);淫羊藿苷干预后,P-p65表达减少(P<0.05),IκB-α增多(P<0.05).对照组NF-κB的DNA结合活力较弱,CSE组显著性增强(P<0.05),淫羊藿苷干预后减弱(P<0.05).结论:淫羊藿苷抑制CSE诱导的ATⅡ细胞IL-8、IL-6、TNF-α表达和NF-κB活化,促进IL-10表达.