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双莲方全时段多波长融合HPLC指纹图谱
目的:建立临床有效方剂双莲方的全时段多波长融合指纹图谱,为双莲方的质量控制提供依据.方法:采用高效液相色谱法,Welch Ultimate LP-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.1％甲酸水(A)-甲醇(B)进行梯度洗脱(0～20 min,25％ ～60％ A;20～40 min,60％ ～65％ A％;40～70 rin,65％ ～45％ A),流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长254,300,320,365 nm.结果:以木犀草素的色谱峰为参照峰,共确定18个色谱峰,建立了临床有效方剂双莲方的全时段多波长指纹图谱.根据此图谱,对其他成分进行相对定量,规定双莲方中其他成分相对木犀草素的含量不得低于0.39,0.24,0.46,0.45,0.73,0.28,0.16,0.41,0.51,2.37,0.77,0.22,0.60,0.36,0.62,0.80,0.52,0.96.结论:该方法简单、准确、科学,适用于双莲方的质量评价.
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双莲方抗肝癌细胞SMMC-7721有效组分配伍研究
目的:通过对双莲方抗肝癌细胞SMMC-7721有效组分配伍研究,确定双莲方抗肿瘤有效组分佳配伍比例.方法:采用CCK-8法检测双莲方中各抗肿瘤有效组分对肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用,确定各有效组分对肝癌细胞SMMC-7721的半数抑制浓度(IC50),通过U11(116)均匀设计对双莲方抗肿瘤有效组分配伍进行优化,并采用CCK-8法和Hoechst 33358/PI双染色法实验比较和验证优化组分配伍对肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的影响.结果:应用均匀设计回归分析得到双莲方佳配伍比例为半枝莲总黄酮∶半枝莲多糖∶半边莲总黄酮∶半边莲生物碱∶夏枯草总黄酮=4.8∶7.6∶7.8∶ 13.5∶1.验证实验显示,佳配伍对肝癌细胞SMMC-7721有较好的增殖抑制和诱导凋亡作用,且其作用优于各组分单用(P＜0.05).结论:通过本实验筛选出的双莲方抗肝癌细胞佳有效组分配伍抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖和诱导其凋亡效果明确,为抗肿瘤新药的研发奠定了基础.
关键词： 双莲方 肝癌SMMC-7721 组分配伍 均匀设计
