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基于自动采血系统与HPLC-QQQ-MS的青藤碱药动学分析
目的:建立灵敏、简便、准确的自动采血系统采集大鼠血浆样本,高效液相色谱-三重四级杆质谱联用技术(HPLC-QQQ-MS)测定血浆中青藤碱含量的方法,并应用于其体内药代动力学研究.方法:SD大鼠颈总静脉插管,待清醒后按40 mg· kg-腹腔注射青藤碱,应用自动采血系统在大鼠自由活动状态下采集样品.血浆样品中加入内标(磷酸可待因),乙腈沉淀蛋白,流动相乙腈-水(含0.1％甲酸铵)梯度洗脱.质谱采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测模式(M RM),定量分析离子对分别为青藤碱m/z 330.0,磷酸可待因m/z 300.0.利用WinNonlin软件计算药代动力学参数.结果:血浆中青藤碱在5.0～500.0 μg·L-1线性关系良好,定量下限1μg·L-1,样品处理方法的提取回收率＞88％,日内及日间准确度101.08％ ～ 111.08％,RSD均＜10％,稳定性良好.血浆中青藤碱的达峰时间(tmax),药峰浓度(Cmax),药时曲线下面积(AUC0-24h),表观分布容积(V/F),清除率(CL/F),平均驻留时间(MRTo.24h)分别为(1.65±1.48)h,(210.43±96.35) μg·L-1,(1 053.80±427.69)h·μg·L-1,(252.65±57.36)L·kg-,(30.37±11.85)L·h-1·kg-1,(5.15±2.47)h.结论:建立的方法有效控制了采血过程对药动学分析结果的影响,样品用量少,简便、准确、可靠,能够满足自由活动大鼠体内青藤碱连续定量分析和药代动力学研究.
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自由活动大鼠微电极脑电和微透析模型的建立
中枢神经递质如乙酰胆碱、谷氨酸在调节中枢神经系统功能方面发挥重要作用,其变化可以导致脑电活动的改变.微透析技术能动态监测活体大鼠大脑皮层细胞外神经递质的变化,分析具有时间、空间分辨性,不经处理直接测定及易于自动化等优点[1],而自由活动大鼠的微透析模型还能避免麻醉药、手术操作创伤等因素的干扰,有利于进行麻醉药等对机体影响的对照研究.
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一种用于吗啡心理渴求研究的自由活动动物神经元胞外记录法
本文描述了一种将环境线索相关的大鼠吗啡成瘾模型与一种适用于自由活动动物的神经元单位放电胞外记录法相结合的实验方法.该方法成功地用于研究成瘾大鼠海马CAl区神经元的放电特征,从而在动物行为的基础上寻找到更为准确、客观的细胞学特征,并试图将这种细胞学特征作为成瘾动物特有的电生理学指标之一.
