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正北芪中一种免疫活性蛋白质提取工艺的优选
目的:优选正北芪中一种免疫活性蛋白AmPR10-16(16.0 kDa)的提取工艺.方法:以正北芪中AmPR10-16的可溶性蛋白二级结构的圆二色性考察提取温度,在单因素试验基础上,以AmPR10-16在SDS-PAGE胶图中的蛋白条带吸光度(峰面积)为指标,采用L9(34)正交试验考察提取温度、料液比、提取时间、提取溶剂、粒度、提取次数对AmPR10-16提取工艺的影响,辅以BCA法测定可溶性蛋白含量作为佐证.结果:AmPR10-16佳提取工艺为药材粉末过4号筛,加16倍量pH 8.0的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)于40℃常压水浴提取60 min,每10 min搅拌1次.AmPR10-16提取率0.063 g·g-1.结论:优化的提取工艺能正确反映AmPR10-16提取率的高相对量,为AmPR10-16的进一步研究提供了稳定、合理、可行的提取工艺.
关键词： 正北芪 蛋白质 蛋白质二级结构 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 二喹啉甲酸法 -
胱抑素C抗体的质量评价及应用分析
目的将日本进口的胱抑素C（Cys C）抗体与某公司制备的兔抗Cys C抗体、羊抗Cys C抗体进行质量检测，初步应用试验评估这3种抗体能否用于定量检测血清Cys C （胶体金免疫比浊法）试剂盒的研发。方法分别用紫外分光光度法、二喹啉甲酸（BCA ）法检测3种Cys C抗体浓度；以聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度；采用酶联免疫吸附法（ELISA）测效价；然后将这3种Cys C抗体分别标记胶体金颗粒，以胶体金免疫比浊法测定血清Cys C ，比较其初步应用性。结果日本进口Cys C抗体浓度高达15．0～16．0 mg/mL ，某公司自制兔抗Cys C抗体、羊抗Cys C抗体浓度范围在3．0～4．0 mg/mL之间；聚丙烯酰胺凝胶电泳显示3种抗体纯度相近，结果为85％。其抗体效价大于或等于1∶104；胶体金免疫比浊法测定Cys C的临床比对结果证实公司自制抗体与日本进口Cys C抗体有较好的可比性。结论某公司的兔抗Cys C、羊抗Cys C抗体与日本进口Cys C抗体虽浓度不同，但均具有高纯度和高效价的特点，可用于定量检测血清Cys C（胶体金免疫比浊法）试剂盒的研发。
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二喹啉甲酸法在食品加工用具蛋白质残留现场快速检测的应用
[目的]探讨二喹啉甲酸法现场快速检测食品加工用具上蛋白质残留的应用前景。[方法]以棉签为反应载体,通过检测限测定试验、反应时间条件试验、还原性物质干扰试验和现场应用试验,研究二喹啉甲酸法检测蛋白质的检测限、干扰因素和实际应用情况。[结果]棉签二喹啉甲酸法能检测50μg以上的蛋白质,5000μg的3种还原糖、低于2μg的维生素C和5μg维生素B1不会产生干扰。[结论]棉签二喹啉甲酸法方法简便,结果直观,检测限低,是现场快速检测食品加工用具蛋白质残留的理想方法。
