针刺对部分切断背根猫备用背根节c-fos表达的影响

目的:探讨针刺对部分切断背根猫备用背根节c-fos表达的影响,为了解c-fos与针刺促进脊髓可塑性的关系奠定基础.方法:取成年健康雄性猫10只,随机分2组:手术7 d组及针刺备用根7 d组,每组5只动物.取各组术侧L6背根节于-20 ℃恒冷切片机上连续切片,片厚20 μm,分别用兔抗c-fos(1∶1000)抗体行免疫组化ABC法染色.观察并测量各组背根节中c-fos蛋白的分布和单位面积c-fos阳性神经元数.进行两样本均数比较的t检验.结果:针刺备用根后,备用背根节中的c-fos阳性神经元数与手术组比显著增加(P<0.05).结论:针刺备用根后c-fos在备用背根节表达增加,提示c-fos可能在针刺促进脊髓可塑性中发挥作用.

部分背根切断对备用背根节NT-3表达的影响

目的探讨部分去背根后备用背根节(L6)各类细胞NT-3及其mRNA的含量变化. 方法对成年雄性猫行单侧部分背根切断术(切除一侧L1～L5,L7～S2 DRG,保留L6为备用根).取正常组一侧和术后3d及7d组手术侧的L6 DRG制作20μm厚冰冻切片,分别用NT-3抗体及NT-3 cRNA探针行免疫组织化学及原位杂交染色.观察NT-3及其mRNA在DRG各类细胞的分布,测定NT-3及其mRNA在神经元和卫星细胞的光密度值,所得数据用q检验进行统计分析. 结果部分去背根后,各时相备用背根节大神经元内NT-3的光密度值较正常者进行性减少,(P<0.05),而NT-3mRNA的光密度值术后3d减少,7d回升至近正常者水平.比较之,小神经元和卫星细胞NT-3及其mRNA的光密度值进行性增多(P<0.05). 结论部分背根切断对备用背根节各类细胞NT-3表达的影响不同,其功能意义可能与NT-3参与脊髓Ⅱ板层可塑性有关.

部分背根切断改变备用背根节神经元和卫星细胞脑源性神经营养因子的基因表达

目的探讨部分去背根后备用背根节(L6)各类细胞脑源性神经营养因子(BDNF)及其mRNA的量变情况. 方法对成年雄性猫行单侧部分背根切断术(切除一侧L1～L5、L7～S2 DRG,保留L6为备用根).取正常组一侧和术后3d及7d组手术侧的L6 DRG并分别行免疫组织化学及原位杂交染色.观察BDNF及其mRNA在DRG各类细胞的分布,测定BDNF及其mRNA在神经元和卫星细胞的光密度值. 结果部分去背根后3d,中小神经元内BDNF及其mRNA的光密度值较正常者明显减少(P<0.05),而7d时又恢复近正常水平(P>0.05).BDNF及其mRNA在大神经元的光密度值术后3d无明显变化,而7d时较正常者明显减少(P<0.05).比较之,卫星细胞BDNF及其mRNA的光密度值术后7d时明显升高(P<0.05),术后3d与正常者比未见明显变化. 结论部分背根切断导致备用DRG各类细胞BDNF的表达水平发生不同程度的改变.提示备用DRG内BDNF的变化与脊髓Ⅱ板层可塑性有关.

部分背根切断及针刺对备用背根节神经元血小板源性生长因子表达的影响

目的:探讨部分去背根及部分去背根后针刺对备用背根节神经元血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响.方法:制备猫双侧备用背根节模型,并针刺位于右侧备用根支配区的两组穴位,针刺7 d及14 d后分别取针刺、非针刺侧备用背根节,行免疫组织化学ABC法显色.分别计数各组阳性神经元总数以及大、中小阳性神经元的数量.结果:PDGF在备用背根节的大、中小神经元均有表达.部分背根切断后,针刺侧、非针刺侧PDGF阳性神经元总数及中小阳性神经元数在7 d时较正常显著减少,针刺后7 d时,PDGF阳性总数及大神经元数针刺多于非针刺侧,针刺14 d时,阳性总数及中小神经元数多于非针刺侧.结论:部分背根切断及针刺可影响PDGF在备用背根节的表达,这种作用显效的时间因不同时相、不同类型的背根节神经元而异.

针刺对备用背根节神经元CNTF和PDGF表达的影响

目的 探讨部分去背根后针刺对备用背根节神经元睫状神经营养因子((CNTF)及血小板源性生长因子(17DGF)表达的影响.方法 制备猫双侧备用背根模型(切除双侧L1～L5、L7～S2背根节,保留L6背根节为备用背根节).针刺位于右侧备用根支配区的两组穴位.针刺7 d及14 d后取备用背根节用CNTF抗血清(1:500)及PDGF抗血清(1:200)行免疫组织化学ABC法染色.分别记数各组阳性总、大及中小神经元的数量.结果 正常组左右L6背根节的细胞数无差异,CNTF、PDGF阳性神经元数在7 d、14 d时与正常组比较无差异.针刺侧CNTF阳性总、大及中小神经元数在针刺7 d时均显著多于非针刺侧(P＜0.05).而针刺14 d时,只有阳性大神经元数多于非针刺侧(P＜0.05).PDGF阳性总及大神经元数针刺7 d时多于非针刺侧(P＜0.05),针刺14 d时,阳性总及中小神经元多于非针刺侧(P＜0.05).结论 针刺可促进去背根后备用背根节CNTF、PDGF的表达,这种促进作用显效的时间因不同因子和不同种类的背根节神经元而异.

部分背根切断对备用背根节神经元EGF表达的影响

目的研究部分去背根对备用背根节神经元表皮生长因子(EGF)表达的影响.方法制作猫备用背根模型,在3d、7d及14d时取备用背根节用EGF抗血清(1:200)行免疫组织化学ABC法染色.分别计数各组大、中小及总阳性神经元的数量.结果EGF在备用背根节的大、中小神经元均有表达.EGF总、大、中小阳性神经元数3d时较正常均明显减少(P＜0.05),7d时,总阳性神经元与正常相比无差异,大阳性神经元较正常明显增加(P＜0.05),而中小阳性神经元较正常继续减少(P＜0.05),14d时均又与正常无差异.结论部分背根切断对备用背根节神经元EGF总、大及中小阳性神经元的表达有不同的影响.但都经历了3d时较正常减少,14d恢复至正常水平的变化趋势.

猫备用背根节内源性NGF对节内神经元的营养作用

猫备用背根节NGF表达的变化及作用模式初探

成年猫备用背根节内神经营养素-3对节内神经元的神经营养作用

部分背根切断及针刺对备用背根节GDNF和FGF-2表达的影响

针刺对备用背根节神经元NP-1表达的影响

目的探讨针刺对备用背根节(dorsal root ganglion,DRG)NP-1表达的影响.方法将25只成年雄猫分为5组,即假手术组、单侧备用背根手术7 d组、单侧备用背根手术并针刺7 d组、单侧备用背根手术14 d组和单侧备用背根手术并针刺14 d组.通过免疫组化ABC法,观察各组备用DRG中NP-1的免疫反应神经元数目.结果在假手术组,NP-1阳性神经元主要定位于部分中小神经元及少数大神经元胞浆中;部分背根切断7 d后NP-1阳性中小神经元数较假手术组明显减少( P ＜0.05),NP-1阳性大神经元数与假手术组者差异无统计学意义( P >0.05);而术后14 d,NP-1阳性中小神经元数较7 d组明显增多( P ＜0.05),且回升至假手术组水平,NP-1阳性大神经元数与手术7 d组差异无统计学意义( P >0.05);针刺7 d组较手术7 d组NP-1阳性中小神经元数增多( P ＜0.05),但尚未回升至假手术组水平,NP-1阳性大神经元数减少( P ＜0.05);针刺14 d组各类阳性神经元数目与手术14 d组及针刺7 d组差异均无统计学意义( P >0.05).结论针刺可上调NP-1在备用DRG中小神经元的表达.

部分背根切断对备用背根节神经元CNTF、PDGF表达的影响

目的研究部分去背根对备用背根节神经元睫状神经营养因子(CNTF)和血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响.方法制作猫备用背根模型,分别在3 d、7 d及14 d时取备用背根节用CNTF抗血清、PDGF抗血清行免疫组织化学ABC法染色.分别计数各组阳性神经元总数以及大、中小阳性神经元的数量.结果两因子在备用背根节的大、中小神经元均有表达.CNTF阳性神经元总数及中小阳性神经元数均在3 d时明显减少(P＜0.05),7 d、14 d时与正常比较无差异,大阳性神经元在各个时间段与正常相比无差异.PDGF阳性神经元总数及中小阳性神经元数在3 d、7 d时均较正常显著减少(P＜0.05),14 d时与正常无差异,大阳性神经元数各个时间段均无差异.结论部分背根切断对备用背根节内不同神经元表达CNTF、PDGF有不同的影响.

成年猫备用背根节内神经营养素-3对节内神经元的神经营养作用

目的探讨成年猫部分去传入后备用背根节内神经营养素-3对节内神经元的神经营养作用.方法切断L1、L3、L5和L7背根,术后第7 d摘取L2、 L4和L6背根节做分离细胞培养,对正常背根节、备用背根节和备用背根节加抗体封闭3个实验组中神经元存活、突起生长等情况进行观察比较.结果备用背根节组存活细胞和细胞微团数目以及神经突起长度均明显高于正常组和抗体封闭组.结论备用背根节内神经营养素-3对节内神经元有维持存活、促进突起生长的作用.

针刺对背根节神经元GDNF表达的影响

目的研究部分去背根及针刺对背根神经节神经元胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响.方法制作猫备用背根模型并针刺备用根支配区的两组穴位,足三里和悬钟,伏兔和三阴交.针刺7 d后取备用背根节用GDNF抗血清(1∶1000)行免疫组织化学染色.分别计数各组大、中、小阳性神经元的数量.结果非手术组GDNF阳性神经元数量为55%,其中大神经元为25%,中神经元为14%,小神经元为16%;术后非针刺组,阳性神经元总数为35%,较非手术组明显下降(P＜0.05),主要为大神经元(5%)数量减少,而阳性中(13%)、小神经元(17%)数量变化不明显,但染色明显加深.针刺组GDNF阳性神经元数量又明显增加至90%,其中阳性大神经元28%,中神经元17%,小神经元45%. 结论背根节GDNF阳性大神经元数量在去部分背根术后7 d显著下降,而针刺可逆转这种变化.GDNF阳性中、小神经元数量在术后7 d并无明显变化,但针刺后表达显著增加.

内源性GDNF在针刺促进损伤脊髓神经元轴突出芽中的作用

目的 探讨内源性胶质源性神经营养因子(glia derived neurotrophic factor,GDNF)在针刺促进SD大鼠脊髓神经元轴突出芽中的生物学机制.方法 25只雌性SD大鼠随机分为单侧备用根手术组、针刺组、针刺并GDNF抗体封闭组.切除脊髓单侧L1～L3及L5～L6背根节(dorsal root ganglion,DRG),保留L4背根为备用根,制备单侧备用根模型.选择足三里和悬钟、伏兔和三阴交两组穴位进行针刺实验.免疫组化和辣根过氧化物酶(HRP)追踪分别检测GDNF及背根神经节(DRG)源的神经纤维表达变化.结果 针刺可显著增加GDNF在受损脊髓中的表达,而抗体封闭可显著逆转该作用.结论 针刺可能通过增加内源性GDNF的表达促进损伤脊髓神经元形态和功能修复.

部分背根切断后备用 DRG卫星细胞NGF、BDNF和NT-3的表达变化

为探讨部分去背根猫备用背根节(L6)卫星细胞NGF、BDNF和NT-3的表达变化,将成年雄猫20只分为正常对照组和术后3 d、术后7 d及术后10 d三个实验组.实验组行单侧部分背根切断术(切除一侧L1～L5,L7～S2 DRG,保留L6背根为备用根).取正常组一侧和术后3 d、7 d及10 d实验组手术侧的L6 DRG制作20μm厚冰冻切片,行免疫组化反应;观察NGF、BDNF和NT 3在DRG卫星细胞的分布,计数各组L6DRG的NGF、BDNF和NT 3的阳性卫星细胞数量.结果发现,部分去背根术后7 d和10 d组L6 DRG的NGF、BDNF和NT-3的阳性卫星细胞数量较术后3 d组和正常组者明显增高(P＜0.01).表明,单侧部分背根切断导致备用DRG卫星细胞的NGF、BDNF和NT-3的表达上调,这一变化可能与脊髓可塑性有关.