首页 > 文献资料
-
胶原诱导类风湿关节炎小鼠的重要脏器病理变化
目的:观察胶原诱导关节炎(Collagen Induced Arthritis,CIA)小鼠发病高峰期重要脏器的病理变化.方法:20只雄性DBA/1小鼠随机分为正常组和模型组,模型组给予牛Ⅱ型胶原混合完全弗氏佐剂诱导CIA模型.造模后每周进行关节炎指数评分,于第63天处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾各组织和踝关节,利用HE染色法观察各脏器的病理变化,并采用Real-time PCR法检测小鼠肺组织中转化生长因β1(Transforming Growth Factor Beta 1,TGF-β1)以及肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor Alpha,TNF-α)的mRNA表达水平.结果:成功建立了DBA/1小鼠胶原诱导关节炎模型.HE染色结果表明,除了踝关节出现明显的病理变化外,CIA小鼠的肺部有大量的炎细胞浸润,肺泡间隔增厚,肺泡腔中有炎性浸出物,而心脏、肝脏、脾脏和肾脏没有出现明显的病理变化.Real-time PCR结果显示病变的小鼠肺组织中TGF-β1和TNF-α的含量均显著高于正常的肺组织.结论:胶原诱导的DBA/1小鼠,其踝关节呈现严重的病理变化,其肺部也出现明显的炎症,且与类风湿关节炎肺部并发症的病理变化有相似之处,这些结果提示该模型可用于类风湿关节炎肺部病变的相关研究.
-
雷公藤甲素对胶原诱导型关节炎小鼠骨与关节的影响
目的 观察雷公藤甲素对胶原诱导型关节炎(CIA)模型小鼠骨与关节破坏的影响.方法 Ⅱ型胶原尾根皮下2次免疫诱导DBA/1小鼠建立CIA模型,第1次免疫后14～42 d,各给药组分别灌服雷公藤甲素(8.18、16.36、32.72μg/kg)和甲氨蝶呤(0.1 mg/kg),定期观察临床症状和发病情况,42 d取材,观察组织病理学和放射学变化,并用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)对破骨细胞特异性染色后进行TRAP阳性细胞计数.结果 雷公藤甲素能显著降低CIA小鼠的临床积分和发病率,减轻关节滑膜、软骨和骨的组织病理学变化及X光片的骨破坏程度,改善关节间隙,增加膝关节和腰椎骨密度,降低膝关节的骨髓腔和炎性肉芽组织中TRAP阳性细胞的数量.结论 雷公藤甲素对CIA小鼠的关节炎症和骨破坏具有一定的抑制作用.
-
补肾强督方对DBA/1小鼠组织形态学及Wnt通路的影响
目的 观察补肾强督方对自发性强直性脊柱炎模型DBA/1小鼠关节韧带及附着点骨化程度和DKK1/Wnt通路的影响,探讨补肾强督方防治强直性脊柱炎的作用机制.方法 将30只12周龄的雄性DBA/1小鼠随机分为模型组、阳性药物组、补肾强督方低、中、高剂量组,每组6只,另设6只同周龄C57BL/6小鼠作为空白组.补肾强督方低、中及高剂量组分别灌胃低、中、高浓度的补肾强督方,所含生药重量分别为11.25、22.5、45 g/(kg·d),0.2 mL/只,每日1次;阳性药物组灌胃塞来昔布胶囊0.8 mg/只,0.2 mL/只,每日1次;模型组及空白组灌胃等量的生理盐水.连续饲养、灌胃12周.定期观察小鼠体重、饮食、大便、毛发等情况.每两周评价1次小鼠关节炎体征.处死后取小鼠跟腱部位进行大体观察,对跟腱组织行HE染色,用免疫组化法检测小鼠跟腱中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(bonegam ma-carboxyglutam ic-acid-containing proteins,BGP)、DKK1、Wnt5a的蛋白表达.结果 与空白对照组比较,模型组关节炎体征评分明显升高,而补肾强督方各剂量组及阳性药物组评分均低于模型组(P＜0.05).跟腱组织病理观察显示,正常组无炎性细胞及成纤维细胞浸润,组织形态结构正常;模型组出现不同程度的软骨及骨形成、炎性细胞及附着点成纤维样细胞浸润;各给药组小鼠跟腱组织多见散在淋巴细胞浸润,软骨及骨形成较少见.与空白组比较,模型组组织标本骨化评分升高,补肾强督方各剂量组及阳性药物组评分均低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).与空白组比较,模型组DKK1蛋白表达降低,Wnt5a蛋白表达升高(P＜0.05);与模型组比较,补肾强督方高、中剂量组DKK1蛋白表达升高,Wnt5a蛋白降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 补肾强督方可能通过抑制经典Wnt通路来延缓自发性强直性脊柱炎模型DBA/1小鼠关节炎及骨化程度的发生与发展.
-
DBA/1小鼠胶原诱发关节炎模型的特征及鉴定
目的 建立胶原诱发关节炎(CIA)的DBA/1小鼠模型,对其发病特点、临床表现特征及病理学变化分别予以分析,为相关药物疗效评价提供合适模型.方法 将牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂充分乳化,在DBA/1小鼠尾根部2～3 cm处皮内注射100 μl混合乳剂,3周后再重复注射等量乳剂,动态观察小鼠的临床表现,如肿胀程度、炎症指数和体重变化等,对中晚期发病关节进行组织病理学检测.结果 在首次免疫后28 d左右,胶原注射小鼠踝关节开始出现明显红肿,5～6周肿胀厚度达到高为(3.42±0.34)mm,小鼠的CIA发生率为100%,病理学结果显示,患病关节表现出周围炎性细胞浸润、滑膜增生、软骨和骨骼破坏等较为典型的变化;正常对照组小鼠则无上述表现;地塞米松磷酸钠注射液治疗组小鼠的上述表现明显减轻.结论 DBA/1小鼠皮下注射牛Ⅱ型胶原,可成功诱导CIA模型,而且发生率为100%,该模型在临床发病特点、组织病理学改变等方面,较充分模拟了人类RA的病变特征,适用于开展RA防治药物或其机制的实验研究.
-
DBA/1小鼠与C57BL/6小鼠胶原诱导性关节炎模型的比较研究
目的：对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis，CIA)在不同品系小鼠(DBA/1小鼠和C57BL/6小鼠)的发病情况进行比较研究，以期寻找出一种适合制备CIA模型的小鼠品系。方法：用鸡Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen， CⅡ)乳剂分别免疫DBA/1小鼠和C57BL/6小鼠诱导CIA，进行关节外观的观察及关节炎临床评分。结果：免疫后第31天， DBA/1小鼠出现关节红肿，关节炎临床评分升高，在第39天达到高峰。随着时间的推移，小鼠关节红肿等急性炎症现象有所减退。用改进方法免疫的C57BL/6小鼠于第21天开始出现关节红肿、临床评分升高现象。结论：在制备CIA模型时建议首选DBA/1小鼠。
-
葡萄糖-6-磷酸异构酶混合肽段诱导的 DBA／1小鼠类风湿性关节炎模型的建立
目的：利用葡萄糖-6-磷酸异构酶（ GPI）单一肽段及混合多肽片段免疫DBA／1小鼠，建立类风湿性关节炎（ RA）模型，分析其主要评价指标及特点，为探讨RA的免疫机制及治疗提供新的理想动物模型。方法：hG-PI325-339、hGPI469-483多肽片段和hGPI325-339单一肽段分别与完全弗氏佐剂充分乳化后，于小鼠尾根部皮下注射进行造模，并从体重变化、足踝关节症状评分、足踝关节病理改变、外周血及脾组织CD4＋T细胞的表达、外周血iNKT细胞比例以及血清TNF-α和IL-6水平等方面进行模型鉴定及分析。结果：模型小鼠在造模第8天，后爪先出现红肿，逐渐加重累及四肢，第14天红肿达到高峰，足踝肿胀，行动不利，此后开始逐渐缓解；组织形态学观察发现足踝关节有炎症细胞浸润，以单核细胞与淋巴细胞为主，浆细胞少量出现，混合肽段的炎症状况明显强于单肽片段。与健康对照组和单肽片段模型组相比，混合肽段模型组体重增长缓慢；外周血、脾脏CD4＋T细胞数量明显增多；炎症高峰期外周血iNKT细胞比例下降明显（P＜0．05），血清中TNF-α水平显著升高（P＜0．05）。结论：混合GPI肽段诱导的RA模型小鼠在免疫学特征，特别是iNKT细胞免疫病理方面与RA患者尤为接近，可作为RA免疫机制研究和治疗的良好工具。
关键词： DBA/1小鼠 葡萄糖-6-磷酸异构酶 类风湿性关节炎 iNKT细胞
