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含氯消毒剂抗冻剂的研究
目的 研究含氯消毒剂的抗冻剂及其对含氯消毒剂杀菌能力的影响,以便为含氯消毒剂在低温条件下使用提供科学依据.方法 采用理化分析和悬液定量杀菌试验方法进行了实验室研究.结果 以含有效氯92 mg/L的84消毒液对悬液内大肠杆菌作用8 min,平均杀灭对数值为3.67;在相同有效氯含量条件下加入抗冻剂A和B的84消毒液作用略有加强.在-25℃条件下,单独84消毒液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作用10 min基本无杀灭作用.用含有效氯368 mg/L和1840 mg/L的84消毒液加入抗冻剂A和B对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作用10 min内均可达到完全杀灭.结论 在84消毒液内加入以乙醇和甲醇为主要成分的抗冻剂,于-25℃低温条件下仍能有效杀灭细菌繁殖体,并有一定增效作用.
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血管低温保存的实验研究
血管组织的低温保存具有重要的药疗和实验研究价值.低温保存过程是离不开抗冻剂的;合理地选择和配制抗冻剂,并选取佳降温与复温速率,对低温保存的成败是至关重要的.本文主要研究了在佳降温复温过程中抗冻剂DMSO浓度变化对小牛主动脉保存后细胞活性和功能的影响.实验结果表明:DMSO浓度为15%时,血管保存效果好,70%的血管组织超微结构保存完好,血管对10-6Mnorepinephrine的收缩力达到新鲜血管的80%左右,对acetylcholine的舒张力达到30～40%,动脉血管的其他功能保持完好.
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工作场所空气中1-甲氧基-2-丙醇的气相色谱法测定
1-甲氧基-2-丙醇又称丙二醇单甲醚,是具轻微醚类气味的挥发性无色液体,主要作为溶剂、分散剂或稀释剂用于涂料、油墨、印染、农药、纤维素等工业,也可用作燃料抗冻剂、清洗剂、萃取剂,还可用作有机合成原料.
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空气中乙二醇气相色谱测定法
乙二醇(Ethylene glycol),分子式为CH2OHCH2OH,分子量为62.07.乙二醇为无色澄清粘稠液体,有甜味,有毒,易吸水,常作为抗冻剂,有机合成及化纤工业的原料.我国乙二醇国家标准为20mg/m3;车间空气监测检验方法一书报导了乙二醇气相色谱法,该方法用SE-30柱,考虑到食品卫生均用GDX-102柱分析醇类化合物,为一柱多用,避免经常换柱麻烦,我们试验用GDX-102柱分析车间空气中乙二醇,现将结果报导如下:
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液氮快速冻存法保存人羊膜抗冻剂筛选研究
目的 观察不同抗冻剂预处理人羊膜后快速液氮保存的效果.方法 剥取剖宫产胎膜中羊膜,分别用生理盐水(C)组、DMEM/甘油(D1)组、DMEM/甘油/二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO) (D2)组、DMEM/甘油/DM-SO/海藻糖(D3)组预处理并标记后直接投入液氮中保存.于冻存第1、3、6、12个月取出,行台盼蓝、苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色,计算羊膜上皮细胞存活百分率(存活率)、上皮细胞结构(细胞结构),并与新鲜羊膜比较.结果 C、D1组随着保存时间延长,存活率1＞3＞6＞12个月(P＜0.05),细胞结构破坏也逐步加重.D2组内存活率1＞3个月(P＜0.05),3＞6＞12个月(P＞0.05),保存1、3个月的羊膜细胞结构接近新鲜羊膜,6、12个月有轻微改变.D3组内各时间点存活率有下降(P＞0.05),细胞结构变化不明显.各组各时间点羊膜细胞存活率:新鲜羊膜＞D3＞D2＞D1＞C(P＜0.05；D3组保存1个月与新鲜羊膜比较,P＞0.05).D2、D3组各时间点存活率＞新鲜羊膜的70％.结论 DMEM/甘油/DMSO/海藻糖抗冻剂预处理的羊膜,经快速液氮冻存1年后的效果好.
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不同抗冻剂预处理对直接快速液氮冻存人羊膜活性的影响
目的:筛选一种抗冻剂配方,为建立深低温高活性保存的羊膜库提供依据.方法:选取12只健康剖宫产产妇羊膜,根据预处理抗冻剂的不同随机分为4组:A组(空白对照组),B组(DMEM/甘油组),C组(DMEM/甘油/DMSO组),D组(DMEM/甘油/ DMSO/海藻糖组).冷冻保存后第1,3个月取羊膜行HE与台盼蓝染色,分别观察羊膜结构,计算羊膜上皮细胞死亡率,并与新鲜羊膜(E组)比较.结果:E组:上皮细胞呈柱状、排列整齐紧密,细胞膜清晰,细胞核圆润蓝染,基底膜连续,细胞死亡率为(6.95±1.95)%.A组:保存1,3个月羊膜上皮层结构完整性均破坏、核固缩呈深蓝染,基底膜渐变为模糊不清.细胞死亡率分别为(39.96±5.84)%,(81.50±4.50)%,两组比较差异有统计学意义(t=13.796,P<0.05).B组:保存1,3个月细胞变形,核固缩加剧,基底膜渐变为不连续.细胞死亡率分别为(21.61±6.65)%,(36.76±10.72)%,两组比较差异有统计学意义(t=2.940,P<0.05).C组:保存1个月后类似新鲜羊膜,保存3个月后羊膜上皮细胞扁平,细胞核深染固缩,基底膜较完整.细胞死亡率分别为(14.08±3.21)%,(29.68±8.19)%,两组比较差异无统计学意义(t=4.344,P>0.05).D组保存1,3个月形态结构接近新鲜羊膜,死亡率分别为(8.51±1.75)%,(12.70±5.70)%,两组比较差异无统计学意义(t=1.722,P>0.05).保存1个月的A、B、C组死亡率与D、E组比较均有统计学差异(P<0.05),D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05);保存3个月的A、B、C、D、E各组间比较均有统计学差异(P<0.05),但D组存活率仍然达到87.3%.结论:DMEM/甘油/ DMSO/海藻糖可作为新型抗冻剂用于深低温高活性保存羊膜.
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组织工程肌腱低温贮存的初步研究
目的研究深低温冻存组织工程肌腱适宜的抗冻剂.方法选用近交系裸小鼠64只,4只为空白对照组,60只左侧为实验组,右侧为对照组.将第54代转化人胚肌腱细胞与碳纤维和聚羟基乙酸编织带体外复合培养构建组织工程肌腱.组织工程肌腱制备完成后在1、2、3和4号抗冻剂保护下液氮冻存2个月.快速复温后植入实验组修复跟腱缺损,缺损长度为5 mm,占裸鼠跟腱总长65.7%;对照组组织工程肌腱不经冻存处理.术后2、4、6、8和12周后各组取出,观察形态学、组织学和免疫组织化学变化,并行短串联重复位点检测. 结果实验组体内植入的肌腱细胞形态随时间增加而逐渐恢复正常,合成胶原能力逐渐增强,12周后仍有肌腱细胞存活并具有分泌I型胶原功能,与对照组差异逐渐减小.经1号抗冻剂保存的肌腱细胞线粒体空泡减少,肌腱细胞排列整齐,胶原纤维增粗并连接. 结论 1号抗冻剂可以在深低温下保护组织工程肌腱.
