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变异基因检测文献资料
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乙型肝炎病毒基因检测方法研究
目的建立简便、准确、实用的检测乙型肝炎病毒(HBV)基因变异的方法.方法根据HBV基因序列,用巢式聚合酶链反应(nested PCR)分别扩增HBV P基因B区和前C区片段,产物用Apall、SSPl、BSU361酶切,30%Acr胶电泳,分析酶切产物片段长度,建立检测P基因与前C基因变异的方法,对50例慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者检测YMDD和前C区基因序列变异.结果所建的nested PCR方法操作简便、快速、结果准确、经济成本低,灵敏度高,可检测到103拷贝/ml的HBV-DNA.50例慢乙肝患者中,单纯YMDD变异的32例,合并前C变异的4例.20例健康体检者,血清作为阴性对照.结论本方法简便准确,适合较大样本检测,可用于临床常见拉米夫定耐药性HBVP基因变异与前C区基因变异的筛检.
