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定量聚合酶链反应技术对食源性致病微生物的检测效果分析
食源性致病微生物为影响大部分食品的安全及质量的主要原因之一,确立并完善一个快速、定量检测食物中食源性致病微生物的检测技术,具有很重要的现实意义.定量聚合酶链反应(PCR)技术可以敏感、迅速且特异地进行准确定量.深入而高效的利用定量PCR技术,必定会大力促进食源性致病微生物的检测工作的发展.
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甲基化特异性定量 PCR 技术的应用研究进展
表观遗传是指DNA序列不发生变化但基因表达却发生了可遗传的改变，表观遗传改变主要从三个层面调控基因表达：DNA修饰（ DNA甲基化）、蛋白修饰以及非编码RNA的调控（如micro RNA）［1］。DNA甲基化作为研究为深入的一种，在人类胚胎发育、基因印记、肿瘤发生发挥重要作用［2］。原癌基因和抑癌基因在表观遗传学上的异常改变是肿瘤发生的重要机制之一［3］。1996年Herman等发明的甲基化特异性PCR （ MSP ）技术成为甲基化验证的经典方法［4］。2000年Eads 等将荧光定量 PCR 与MSP结合，报道了甲基化定量PCR技术（ Methylight or quantitative MSP， qMSP），将甲基化检测提升到定量研究的高度［5］。现就qMSP的应用研究进展情况综述如下。
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血清HBV DNA含量与HBV标志物澳卡、放免、酶免分析比较
目的探讨血清HBV DNA定量方法与HBV标志物用免疫色谱技术(澳卡)、放射性免疫技术(RIA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)进行比较.方法采用AmpliSensor定量PCR、澳卡、RIA、ELISA对109例门诊患者的血清HBV DNA含量、HBV标志物HBsAg、HBeAg进行分析.结果HBV DNA检测的阳性率89.9%,对HBsAg澳卡与RIA检出的阳性率为83.5%、ELISA为87.2%,四种方法检测的符合率为81.6%;HBV标志物三种方法同时检出为HBsAg阳性的符合率92.6%、HBeAh符合率90.9%;三种方法检出的结果一致有94例,检测的符合率为86.2%,RIA的小检测值可达6.5×103拷贝/ml;在HBsAg(-)、HBeAg(-)中,27.2%HBV DNA含量大于6.9 × 103拷贝/ml.结论HBV标志物三种方法结果无显著性差异,RIA的灵敏度略高于其它两种,在检测HBV标志物HBsAg(-)、HBeAg(-)中,应结合HBV DNA定量检测,才能对HBV的诊断及治疗效果做出正确的评价.
