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  • 基于新型衍生化方法的UPLC-HRMS单克隆抗体N-糖基化分析方法

    作者:铁偲;胡婷;张金兰

    目的:为了满足单克隆抗体药物N-糖分析的实际需要,建立稳定、灵敏、可靠的单克隆抗体药物N-糖分析的分析方法.方法:采用全新的肼基衍生化试剂对N-糖进行衍生化,并对衍生化后的N-糖进行超高效液相色谱高分辨质谱分析.采用与开源数据库比对和多级质谱对检测到的N-糖进行初步定性.结果:新的肼基衍生化分析方法将单克隆抗体药物N-糖分析的灵敏度提高了2~3个数量级,与传统2-氨基苯甲酰胺(2-AB)衍生化相比,灵敏度也有3倍的提高.新的方法条件温和,保证N-糖结构的完整性,实现了多种不稳定唾液酸修饰N-糖的检出.二级质谱的应用提高了结构分析的效率与针对性.结论:本文建立了可靠、灵敏、高效的单克隆抗体药物N-糖分析方法,该方法在实际应用中具有极大的应用前景.

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