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高效液相-迎头分析(HPLC-FA)文献资料
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格列本脲蛋白结合作用的HPLC-FA法研究
目的:建立高效液相色谱-迎头分析法(HPLC-FA)研究格列本脲与人血清白蛋白(HSA)的结合作用.方法:采用HPLC-FA法,色谱柱为Pinkerton GFF Ⅱ-S5-80(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为67 mmol·L-1磷酸盐等渗缓冲液(pH 7.4,I=0.17 mol·L-1),流速0.2 mL·min-1,检测波长230 nm,进样量900μL,柱温37℃.结果:应用非线性回归参数估算求得HSA分子上两类结合位点结合的格列本脲分子数及相应的结合平衡常数:n1=1.5和K1=1.1(μmol·L-1)-1;n2=3.8和K2=0.012(μmol·L-1)-1.结论:HPLC-FA法操作简便,适用于研究格列本脲与HSA的结合作用.本实验选定的进样体积为900 μL.