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5-Fu诱导HepG2细胞凋亡过程中Fas抗原和bcl-XL蛋白的表达及意义
目的研究5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导人肝癌HepG2细胞凋亡过程中Fas抗原和bcl-XL蛋白的表达及意义.方法采用免疫细胞化学法对5-Fu处理的HepG2细胞进行染色,运用图像处理和分析系统定量分析Fas抗原和bcl-XL蛋白表达.流式细胞仪检测抗-Fas-抗体对氟尿嘧啶诱导人肝癌HepG2细胞凋亡百分率的影响.结果在未用药处理的对照组细胞Fas抗原呈弱表达(0.17±0.03),加入0.01 mol/L 5-Fu后Fas阳性表达的细胞数目增加,表达强度增强.作用16 h后Fas抗原表达强度达高峰(0.45±0.05),与对照组比较两者有显著差异(P<0.01).但在0.01 mol/L5-Fu诱导HepG2细胞凋亡过程中癌基因蛋白bcl-XL表达逐渐减弱,经药物处理4、8、16、24h后,其表达分别为0.28±0.03、0.20±0.03、0.14±0.03和0.07±0.02.癌基因蛋白bcl-XL的表达与Fas抗原表达呈负相关(r=-0.787,P<0.01).流式细胞仪分析显示5-Fu作用48 h后,肝癌细胞凋亡百分率为(16.23±0.90)%,而加入抗-Fas-抗体后细胞凋亡百分率显著上升为(40.13±1.45)%(P<0.01).结论5-Fu诱导HepG2细胞凋亡是通过Fas依赖途径,属于第Ⅱ型Fas信号传导途径.该凋亡过程可能与功能性Fas抗原表达上调以及癌基因蛋白bcl-XL表达下调相关.