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RNA干扰CXCR4基因对人恶性黑素瘤A375增殖和凋亡的影响
目的:观察CXCR4基因沉默后人恶性黑素瘤A375细胞增殖及侵袭能力变化.方法:体外培养人恶性黑素瘤A375细胞,分为A、B、C 3组,分别为siRNA组,转染空病毒载体的阴性对照组,细胞不做任何处理的空白对照组.转染后1、3、5、7 d在倒置相差显微镜观察A375细胞分化及形态,MTT比色分析法检测对A375细胞增殖抑制的影响,采用流式细胞分析术,Anexin-ⅴ-PI双染色检测细胞早期凋亡的变化.转染后7d采用RT-PCR检测CXCR4 siRNA表达情况.结果:转染后C组细胞出现不同程度的皱缩、破裂,漂浮细胞增多.转染后1、3、5、7 d,A组OD值低于B、C组(P<0.05),A组早期凋亡率的变化与B、C组有统计学差异(P<0.05).RT-PCR半定量分析结果显示,A、B、C组CXCR4基因 mRNA校正值分别为(0.149±0.043),(0.215±0.030),(0.221±0.020),A 组与B、C组相比差异有统计学意义(P<0.05).结论:CXCR4基因沉默后A375细胞增殖被抑制,早期凋亡增加,CXCR4基因成为恶性黑素瘤治疗的新靶点.
