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心肌细胞定向分化文献资料
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心肌营养素-1诱导小鼠诱导性多能干细胞心肌细胞定向分化的实验研究
目的:观察心肌营养素-1(CT-1)对小鼠诱导性多能干细胞(miPSCs)心肌细胞定向分化的诱导作用.方法:实验分为对照组与CT-1处理组.miPSCs经悬滴法诱导形成拟胚体,第3天培养基中加入1μmol/ml CT-1(CT-1组),对照组采用普通培养基.于第4、7、10和14天,收取细胞样本,采用实时PCR检测心脏特异标志物基因的表达.用免疫荧光染色及流式细胞术检测干细胞标志物Oct4和心肌特异性分化标志物肌钙蛋白I(cTnI)的表达.用透射电镜观察心肌样细胞的超微结构.结果:CT-1组第10天,样本中心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)基因表达的水平为同期对照组的1.75倍,有显著性差异(P<0.05).免疫荧光染色法检测显示,两组均有cTnI表达.流式细胞术鉴定的结果显示,对照组与CT-1组cTnI的阳性率分别为28.5%和56.4%,有显著性差异(P<0.05).电镜观察显示,CT-1组肌原纤维及胞内线粒体明显增多,肌纤维排列规则,可见细胞间桥粒连接和缝隙连接.结论:CT-1可显著提高miPSC向心肌细胞定向分化的效率.
关键词: 心肌营养素-1 小鼠诱导性多能干细胞 心肌细胞定向分化