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MiR-197-3p/STAMP2对ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡及炎症应激的影响
目的 探究miR-197-3p/前列腺六次跨膜蛋白(Six transmembrane protein of prostate,STAMP)2对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡和炎症应答.方法 用ox-LDL处理HUVEC复制内皮细胞损伤模型;RT-PCR检测miR-197-3p和STAMP2表达;ELISA检测细胞凋亡;Western blot用于检测STAMP2,Bax和Bcl-2的蛋白水平;ELISA检测HUVECs中细胞间黏附分子(ICAM)-1,血管内皮细胞黏附分子(VCAM)-1和E选择素(E-selectin)的表达水平;生物信息学预测miR-197-3p的靶基因;并采用双萤光素酶报告系统、qRT-PCR及Western blot验证miR-197-3p与STAMP2的靶向调控关系.结果 ox-LDL能明显上调miR-197-3p的表达(P＜0.05),同时降低STAMP2的表达(P＜0.05),且呈时间依赖性;下调miR-197-3p能够显著抑制ox-LDL诱导的细胞凋亡(P＜0.05),同时降低促凋亡蛋白Bax并增加抑凋亡蛋白Bcl-2 (P ＜0.05);抑制miR-197-3p明显降低ox-LDL诱导的炎症因子的表达(P＜0.05);此外,生物信息学预测提示STAMP2是miR-197-3p的靶基因,而且qRT-PCR及Western blot结果显示抑制miR-197-3p明显上调STAMP2 mRNA和蛋白水平(P＜0.05),从而证实miR-197-3p能够靶向调控STAMP2.结论 MiR-197-3p可以通过靶向调控STAMP2从而调节ox-LDL诱导的HUVECs凋亡及炎症应答,为动脉粥样硬化的靶向治疗提供理论基础.
关键词： miR-197-3p 细胞凋亡 炎症应答 STAMP2 人脐静脉内皮细胞
