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念珠菌类细菌样变异株基因特征初步研究
目的 在对念珠菌发生变异后其形态、结构等生物学性状研究的基础上,进一步探讨念珠菌类细菌样变异株基因特征.方法 在低温、营养缺乏条件下诱导白色念珠菌标准菌株使其变异;用不同浓度梯度的氟康唑等临床常用抗真菌药物诱导白色念珠菌标准菌株变异.采用煮沸法制备真菌基因模板,采用细菌保守基因16S RNA序列引物和真菌保守基因18S RNA序列引物分别扩增16S RNA和18S RNA序列,琼脂糖凝胶电泳,观察并记录结果.同时将细菌保守基因16SRNA扩增片段进行测序,所得序列进行BLAST比对分析.结果 念珠菌类细菌样变异株16S RNA序列均扩增阳性,而白色念珠菌标准株未出现相应的扩增条带.念珠菌类细菌样变异株18S RNA序列扩增除2号菌株有微弱的条带外,其余变异株均未扩增出目的条带,而白色念珠菌标准株则出现相应的扩增条带,表明念珠菌类细菌样变异株基因组中18SRNA序列所占比例不多或是因多次传代遗失.念珠菌类细菌样变异株16S RNA扩增片段经纯化后进行DNA序列测定,BLAST进行比对分析,发现念珠菌类细菌样变异株序列与数据库中细菌序列有较高的相似性.结论 念珠菌类细菌样变异株基因组合有细菌保守基因及少量真菌保守基因,具有原核生物学性状的念珠菌类细菌样变异株是源于真核生物的念珠菌.此研究在生物进化特别是在原核细胞与真核细胞的进化联系上有非常重要的意义.
关键词： 念珠菌类细菌样变异株 基因 PCR -
念珠菌类细菌样变异株生物学性状及遗传学特征研究
目的：了解念珠菌发生变异后其形态、结构等生物学性状的改变情况，并通过其遗传学特征研究从分子水平揭示这种变异发生的机理。方法实验室研究中，利用不同的营养条件及生长环境、不同的唑类抗真菌药物对白色念珠菌标准菌株进行诱导使其变异；临床研究中，从抗真菌治疗效果不佳患者的阴道分泌物、痰液、胸腔积液、胃液等标本中分离念珠菌变异株，并对以上变异株的形态特点、核结构、生化反应、耐药性、菌体组分、遗传学特征等进行研究。结果菌体形态：念珠菌极易发生类细菌样变异，变异株菌体可呈 G＋球菌状、G＋杆菌状、G＋长丝状、G－球菌状、G－杆菌状等；核结构：电镜透射扫描证实念珠菌变异株失去真核细胞固有的核结构而呈原核生物样改变；生化反应：在所观察的20项生化试验中有5项不同；药敏试验：念珠菌发生变异后对原本敏感的抗真菌药物完全耐药，而对原本耐药的普通抗细菌药物敏感，且耐药谱与普通细菌耐药谱相同；菌体组分改变：经质谱仪鉴定念珠菌变异株和变异菌返祖株菌体组分有明显不同；真菌保守基因表达：采取 PCR 技术对变异株进行真核生物保守基因16S sRNA 检测发现，念珠菌发生类细菌样变异后仍表达真核生物保守基因，由此可证明具有原核细胞生物学特性的念珠菌类细菌样变异株是源于具有真核细胞的念珠菌。结论念珠菌极易发生类细菌样变异，变异株各种生物学特性与原核生物酷似。电镜观察具有明确亲缘关系的念珠菌标准菌株、念珠菌类细菌样变异株、变异菌返祖株在核物质存在形式上确有质的改变，此研究在生物进化特别是在原核细胞与真核细胞的进化联系上有非常重要的意义。
关键词： 念珠菌类细菌样变异株 生物学性状 遗传学特征
