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昆明小鼠1-细胞胚的培养研究(摘要)
目的:建立昆明小鼠1-细胞胚的培养系统,对培养液中的磷酸盐、葡萄糖、氨基酸成分的作用进行探讨.方法:使用一种新型培养液(KSOM)养1-细胞胚,建立昆明小鼠1-细胞胚的培养系统;改变CZB液中的磷酸盐、葡萄糖、氨基酸成份,观察这些成份对1-细胞胚发育的影响.结果:(1)成功将昆明小鼠1-细胞胚在化学成分明确的简单培养液(KSOM)中培养至囊胚阶段,得到73%的囊胚率,其中有46%的囊胚发生孵化;(2)将CZB培养液中的磷酸盐成分去除或加入低浓度的糖(0.5mmd)克服了桑椹期阻滞现象,分别获得了49%和45%的囊胚率;(3)谷氨酰胺的去除导致了桑椹率的显著性下降;(4)11氨基酸替换CZB液中的谷氨酰胺并不改善昆明小鼠1-细胞胚的发育.结论:培养液中的磷酸盐成分对胚的发育有害,糖的作用与其浓度有关,低浓度的糖促进了胚的晚期发育,而高浓度的糖抑制了胚的早期发育,谷氨酰胺促进了胚的早期发育.
