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千金藤植物文献资料
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正交实验法优化千金藤属植物的DALP反应体系
目的 建立一套稳定的千金藤植物DALP反应体系,为开展该属植物的DALP分子标记奠定基础.方法 采用正交实验设计,以云南地不容Stephania yunnanenses Lo与地不容Stephania epigaea Lo基因组DNA为模板,对DALP反应程序的重要参数进行优化.结果 佳的反应体系为20μL,包含模板DNA2.0μL,2.5 mmol/L的MgCl22.5 μL,2.5 mmol/L的dNTPs 2.0μL,5 pmol/L的选择性引物1μL,5 pmol/L的反向引物3μL,0.5 U/μL的Taq酶5 μL,10×Buffer 2.0μL,灭菌超纯水2.5μL.结论 该DALP应用反应体系稳定、可靠、重现性好,可有效的地应用于千金藤植物的种间及居群间分类鉴定.
关键词： 千金藤植物 直接扩增片段长度多态性 分子标记 反应体系
