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炎症因子刺激IGF-I基因沉默后的hCASMC细胞PAPP-A、IGF-I的表达及细胞学功能改变的意义
目的 观察炎症因子刺激胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因沉默后的人冠状动脉平滑肌细胞(IGF-I-shRNA-hCASMC)中妊娠相关血浆蛋白-A(PAPP-A)、IGF-I的表达及其细胞学功能改变,为进一步明确IGF轴激素在动脉粥样硬化不稳定斑块破裂中的作用提供实验数据.方法 利用肿瘤坏死因子-α (TNF-α))、白介素-1β(IL-1β)和/或胰岛素样生长因子结合蛋白-4(IGFBP4)刺激IGF-I-shRNA-hCASMC,用Western blot及ELISA检测细胞中PAPP-A、IGF-I的表达.用MTT法及流式细胞仪检测TNF-α、IL-1β、IGFBP4对IGF-I-shRNA-hCASMC细胞功能学改变.结果 用TNF-α+ IL-1β或TNF-α+ IL-1β+ IGFBP4刺激空白对照(CON)组细胞、阴性对照(NC)组细胞、RNA干扰(RNAi)组细胞时hCASMCs中PAPP-A均有较强表达,RNAi组的hCASMCs中PAPP-A的表达量少于另外两组.而未行刺激的三组细胞则无PAPP-A的表达.在TNF-α+ IL-1β+ IGFBP4刺激RNAi组细胞中IGF-I表达量高于仅用TNF-α+ IL-1β刺激和未行刺激组,并且差异具有统计学意义.在RNAi组TNF-α+ IL-1β+ IGFBP4刺激细胞所测的A570值低于TNF-α+ IL-1β刺激细胞(P＜0.01).RNAi组细胞经过TNF-α+ IL-1β或TNF-α+ IL-1β+ IGFBP4刺激后表现为显著性凋亡,与CON组及NC组细胞相比具有统计学意义,RNAi组细胞经TNF-α+ IL-1β+IGFBP4刺激后与经TNF-α+ IL-1β刺激后相比细胞更易凋亡,差异有统计学意义.结论 炎症因子刺激IGF-I-RNAi的hCASMCs可导致细胞增殖力下降,细胞凋亡增加,在局部细胞环境中活性IGF-I增加情况,加剧细胞增殖力下降、细胞凋亡增加.
关键词： 炎症因子 人冠状动脉平滑肌细胞 RNA干扰 IGF-I轴 细胞学功能
