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应用基因表达谱芯片从抗脱落凋亡肺癌A549细胞中筛选转移相关基因
背景与目的 正常上皮或内皮细胞脱离细胞外基质会发生脱落凋亡,但肿瘤细胞可不依赖细胞基质生长而不发生凋亡,这一现象被称为抗脱落凋亡,目前国内外相关研究均认为抗脱落凋亡是肿瘤发生转移的始动环节.本实验旨在比较抗脱落凋亡及正常贴壁生长肺腺癌A549细胞基因组表达差异,从中筛选肺癌转移相关基因.方法 利用多聚羟乙基甲基丙烯酸树脂处理培养皿,致细胞无法贴壁生长,建立抗脱落凋亡肺癌A549细胞系;利用北京博奥生物芯片公司的人类V2.0全基因组寡核苷酸微阵列芯片,检测其与正常贴壁生长A549细胞的基因表达差异性,筛选肺癌转移相关基因.结果 共得到表达差异的基因745个,从中筛选出63个与肺癌转移密切相关的基因.结论 成功建立抗脱落凋亡肺癌A549细胞系并筛选出转移相关差异表达基因,为进一步研究肺癌转移相关信号转导通路及其它相关研究提供依据.
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肺腺癌胸水肿瘤细胞的生物学及形态学研究
目的:模拟体内环境,对胸水中的肿瘤细胞进行生物学及形态学研究.方法:取病理确诊肺腺癌胸膜转移的胸水肿瘤细胞,以肺腺癌原发灶肿瘤细胞为对比,对其进行形态学观察、MTT法绘制生长曲线、计算细胞倍增时间,流式细胞仪测定细胞周期分布及细胞凋亡率.结果:胸水肿瘤细胞生长曲线低平,倍增时间为(115.37±15.74)h,细胞周期分布G0+G1期(58.95±4.13)％、S期(26.2±3.7)％、G2期(14.85±1.3)％;细胞凋亡率,原发组及胸水组活细胞数占90％以上,原发灶肿瘤细胞悬浮培养48h后活细胞数仅为(38.9±6.86)％,扫描电镜示胸水肿瘤细胞膜微孔增大、纤毛呈球样及板样变.结论:肺腺癌原发灶肿瘤细胞与其胸水转移肿瘤细胞在生物学与形态学上存在差异.
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胆管癌脱落细胞的形态学观察与生物学特性实验研究
目的观察人胆管癌细胞系QBC939细胞脱落过程形态学变化,研究其生物学特性.方法光镜、扫描电镜观察原位培养的人胆管癌细胞系QBC939及其脱落细胞的形态学变化,收集脱落细胞,保存在悬浮状态,分别在1、2、4、8、12和24 h接种,计数其1 h后贴壁细胞数并观察其生长情况.结果人胆管癌细胞系QBC939培养至第5天时,光镜可见大量的脱落细胞,扫描电镜可见培养细胞巢状结构中间细胞逐渐变圆,微绒毛逐渐减少,以至消失,在贴壁细胞的邻近面细胞膜也出现同样改变,脱落细胞接种1 h后,可见细胞贴壁生长,各时间组其贴壁细胞数无显著差异.结论人胆管癌细胞系QBC939细胞具有抗脱落凋亡特性,体外培养QBC939 细胞存在脱落-漂浮-种植-生长现象.
