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一个编码lamin样蛋白的基因在人胃癌组织低表达
目的克隆人胃癌相关基因,分析其在胃粘膜组织的表达特征. 方法采集7例胃窦部进展期腺癌患者配对的新鲜癌组织、癌旁组织及正常胃粘膜组织,荧光标记的mRNA差异显示技术(mRNA differential display reverse transcriptase polymerase chain reaction,DDRT-PCR)分析了不同组织间表达基因的差异.对感兴趣的差异基因片段进行了克隆、Northern印迹及核苷酸序列分析.用原位杂交分析了目的基因在30例胃腺癌患者配对的石蜡包埋癌组织及正常胃粘膜组织中的表达特征.结果通过DDRT-PCR获得1条差异片段,在6/7位患者的正常和癌旁组织中的表达高于癌组织,命名为W12.将W12克隆入pGEM-T Easy载体,插入序列命名为GCRG 123.Northern印迹显示与DDRT-PCR一致的结果,人类多组织Northern 显示GCRG 123广泛存在于人正常胸腺、前列腺、睾丸、卵巢、小肠、结肠、外周血中性白细胞.序列分析结果显示GCRG 123由445 bp组成,具有1个完整的开放阅读框架,含49个氨基酸. BLASTX分析显示其编码产物是1个人类lamin样蛋白.该核苷酸序列登录GenBank,登录号AF454554,预测编码产物序列的登录号AAL61668.1.原位杂交显示该基因在正常的胃粘膜上皮细胞和幽门腺高表达,而在胃腺癌组织、不典型增生组织及部分肠化生组织低表达.结论发现1条人类编码lamin 样蛋白的基因,在胃癌及其癌前病变组织低表达.
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生物材料表面固定粘附肽调节小鼠成骨细胞骨钙素的表达
目的：观察材料表面固定粘附肽RGD对小鼠成骨细胞骨钙素mRNA表达的影响。方法：采用自组装单层结构法将含RGD的粘附肽RGDC共价结合在试件表面，建立RDGC和空白对照组。接种小鼠原代成骨细胞，分别收集培养第10，15，21 天的细胞，提取总RNA，Northern印迹杂交法检测骨钙素mRNA的表达。结果：RGD组第15 天即开始出现明显的骨钙素基因表达，对照组的基因表达出现在第21 天。结论：材料表面固定RGD有促进骨钙素基因表达，影响小鼠成骨细胞分化的功能。
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U937泡沫细胞中细胞间粘附分子-1的表达及欧芹素乙的抑制作用
目的:研究在人类单核细胞系U937泡沫细胞中,细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达水平,观测欧芹素乙(欧前胡内酯,imperatorin,IMP)对ICAM-1表达的抑制作用.方法:将U937细胞与80mg/L氧化低密度脂蛋白孵育48h,建立U937泡沫细胞模型.在培养基中预加入不同浓度的IMP(0,25,50,100μmol/L).采用Western blotting检测ICAM-1的蛋白表达;采用Northern blotting检测ICAM-1的mRNA水平.结果:泡沫细胞中ICAM-1的表达显著高于正常U937细胞.ICAM-1的蛋白和mRNA水平分别是正常U937的15和10倍.经IMP50和100μmol/L预处理后,泡沫细胞中ICAM-1的高表达被显著抑制.当IMP浓度达到100 μmol/L时,ICAM-1的蛋白水平降低了79%,mRNA水平降低了74%.结论:经氧化低密度脂蛋白孵育后,U937泡沫细胞中ICAM-1呈现高表达,IMP能显著抑制这种表达.
