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生物医学显微摄影中的几点体会
生物医学显微摄影技术广泛应用于生物医学领域的各个学科当中,它在真实记录科学家们观察、研究各种生物组织微细结构等诸方面起着至关重要的作用.科研结果能否被真实、完美、清晰而生动的表现和记录下来,依赖于我们是否能够十分熟练的掌握"显微摄影"这门技术.通过几年工作实践,我们体会到在"显微摄影"中必须掌握以下要点:1.照相显微镜的调整:要想在显微镜下拍摄出较为满意的照片,在摄影前须对显微镜进行认真仔细的调整.以OLYMPUS BH-2显微镜为例:1)首先要确保照相光路系统清洁、无尘,光轴中心准确无误.2)用照相观察目镜校正照相者眼睛的屈光度:由于每个人眼睛的屈光度不同,在观察显微镜内的图像时存在着一定差异,即某人能看清视野中的图像,其他人不一定能看清楚.如果在非照相的日常显微镜观察中,两人只需分别调整一下聚焦螺旋,以补偿两人眼睛屈光度的不同即可.但是,在显微照相时由于需要把清晰的影像聚焦在感光胶片上,样品与感光胶片的工作距离是固定的,因此不能通过改变其工作距离来调整人眼的屈光度,而必须通过调整照相观察目镜以校正照相者眼睛的屈光度.3)照明光源的调整:进行了精细的聚焦尚不能拍摄出完美的照片,由于各种倍数物镜的光学性能不同,其对照明光源的要求亦不同,在拍摄前一定要进行适当调整.首先要调整聚光镜孔径光阑.聚光镜在显微摄影中的作用很大,它不仅是将光线汇聚后投射到样品上,更重要的是可以通过聚光镜孔径光阑产生与物镜相适应的光束,从而使图像分辨率及反差达到佳.其次,显微镜视场光阑的调整也十分重要,它可以提供出不同面积大小的光束,以消除光线的反射及不规则的散射,从而提高影像的反差.4)色温的调节:如果拍摄彩色胶片,除进行以上的调整之外还需要对光线的色温进行校正 ,特别是彩色反转片.由于彩色反转片是由负像直接形成正像,经过曝光以后,几乎没有校正的可能,因此色温的调节更需准确.2.摄影记录方式:除了以上硬件的设定之外,在准备进行显微摄影之前尚需做好以下准确工作.即必须做好摄影记录,且越详细越好,以便使我们掌握照片在制作及拍摄过程中的原始数据.3.照片放大倍数的计算:由于照相目镜是被放置在显微镜照相光路之中,在外面是看不见的.因此,很多人都错误的用观察目镜或照相观察目镜的倍数来计算照片的放大倍数,这是十分错误的.计算放大倍数时,一定要用照相目镜的倍数乘以所用物镜的倍数,才是底片上的放大倍数. 科研论著
