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不同IL-15转染对NCI-H446 HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ表达及NK敏感性的影响
目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达及NK杀伤敏感性的影响.方法在本室已构建的3种细胞模型(转染IL-15成熟肽基因的NCI-H446/IL-15mp细胞、转染原型IL-15基因的NCI-H446/IL-15细胞和转染以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因的NCI-H446/IL-2sp-IL-15mp细胞)基础上[1],以野生株细胞为对照,流式细胞分析仪(Fluorescence-activated cell sorter,FACS)分析这3种细胞HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定它们对NK杀伤的敏感性.结果野生株NCI-H446细胞表面阳性表达HLA的工类和Ⅱ类分子;转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因后,这两种分子的表达均被抑制为阴性;转染原型IL-15基因后,这两种分子的表达均被显著上调.5名不同健康志愿者的外周血单个核细胞(PBMC)对野生株NCI-H446细胞的平均NK杀伤率低,对NCI-H446/IL-15、NCI-H446/IL-15mp和NCI-H446/IL-2sp-IL-15mp细胞的平均NK杀伤率依次升高.结论转染不同形式IL-15基因对NCIH446细胞的免疫生物学特性影响不同.转染IL-15成熟肽基因或改型IL-15基因,抑制NCI-H446细胞表面HLA的Ⅰ类和Ⅱ类分子表达;转染原型IL-15基因,上调这两种分子的表达;转染不同形式IL-15基因均可增强NCI-H446细胞对NK杀伤的敏感性,但程度不同:以改型IL-15者高,IL-15成熟肽者次之,原型IL-15者低.
