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pEGFP-N2真核表达载体文献资料
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人朊蛋白基因真核表达载体的构建及鉴定
目的：构建人朊蛋白基因（PRN P ）真核表达重组质粒。方法从阿尔茨海默病（AD ）患者外周血白细胞中提取总RNA ，利用RT-PCR的方法扩增编码人PRNP的基因片段，应用基因重组技术将人 PRNP基因片段克隆到真核表达载体pEG-FP-N2中，经XhoⅠ及EcoRⅠ双酶切、单酶切及基因序列测定证实所构建的载体。结果 RT-PCR方法获得人PRNP的基因片段，限制性内切酶酶切分析、PCR法及序列测定证实为正确重组质粒，并且该重组载体能够在SH-SY5Y细胞中表达。结论构建的真核表达重组质粒pEGFP-N2-PRNP通过鉴定，结构正确，为后续研究PRNP的生物学功能奠定了基础。
关键词： 阿尔茨海默病 朊蛋白基因 pEGFP-N2真核表达载体 -
重组质粒pEGFP-N2-Wnt3a的构建和鉴定
目的 构建大鼠Wnt3a真核表达重组质粒.方法 从大鼠脊髓中提取总RNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法扩增编码大鼠Wnt3a的基因片段,应用基因重组技术将大鼠Wnt3a基因片段克隆到真核表达载体pEGFP-N2中,经XhoI及EcoR I双酶切和单酶切证实所构建的载体.结果 RT-PCR方法获得大鼠Wnt3a的基因片段,限制性内切酶酶切分析和PCR法鉴定表明为正确重组质粒.结论 构建的真核表达重组质粒pEGFP-N2-Wnt3a经过鉴定,结构正确,为进一步转染骨髓基质干细胞(BMSCs)和脊髓损伤(SCI)治疗提供研究基础.
关键词： Wnt3a基因 pEGFP-N2真核表达载体 脊髓损伤
