您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
分段扩增文献资料
-
人iASPP全长CDS的分段扩增、克隆及鉴定
目的 初报道的iASPP长度为351个氨基酸,但近发现iASPP的全长应为828个氨基酸,为了探讨全长iASPP的功能,我们采取3分段扩增的策略克隆全长iASPP基因.方法 从HL-60细胞中提取总RNA、DNA,RT-PCR分段扩增目的基因,克隆至pMD19-T simple载体,测序,并亚克隆至pCDNA3.1载体.结果 重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-iASPP经测序,与GenBank上登陆的人iASPP cDNA(gi:60457962)序列完全一致.结论 成功构建了iASPP真核表达载体.
-
人vigilin基因全长编码区的分段克隆及鉴定
目的 为了探讨全长VIGILIN、VIGILIN的N端、VIGILIN的C端以及不同KH组合的功能,采取5分段扩增的策略克隆全长vigilin基因.方法 根据vigilin基因全长编码区内的限制性核酸内切酶位点,将vigilin基因全长编码区分为5段.从意外死亡健康成人肝组织中提取总RNA,RT-PCR分段扩增目的 基因,克隆至pUC118载体,测序,并亚克隆至pUC118载体,对接头部位测序.结果 获得8个大小不同的人vigilin基因编码区片段和全长编码区.重组全长vigilin质粒pC118/vigilin(12+345)经测序,与GenBank上登陆的人vigilin cDNA(NM:005336)序列完全一致.结论 用分段克隆的方法成功获得了人vigilin基因的全长编码区.
