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3D-PCR文献资料
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APOBEC3B羧基端抗乙肝病毒位点的筛选和鉴定
目的:筛选参与APOBEC3B羧基端脱氨酶及抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)活性的重要区域和关键位点.方法:定点突变构建羧基端活性中心附近的3个螺旋区段(α2、α3、α4)的缺失突变体和α4螺旋区内(D316、K320、E321、R327、D328)位点的突变体;Southern blot筛选APOBEC3B抑制HBV复制的重要区段和关键位点;不同DNA变性PCR(differential DNA denat-uration PCR,3D-PCR)和克隆测序进行验证.结果:APOBEC3B羧基端脱氨酶活性中心周围的α3和α4螺旋区缺失后,其抗病毒活性消失;D316位点突变后APOBEC3B的脱氨酶活性和抗病毒活性消失.结论:APOBEC3B羧基端的D316位点是APOBEC3B脱氨酶和抗病毒的关键位点.
