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依赖解旋酶的恒温扩增文献资料
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艰难梭菌感染分子诊断研究现状及进展
艰难梭菌是一种革兰阳性厌氧芽孢杆菌，在自然环境、动物以及人体肠道中广泛存在，是人体肠道的正常菌群。1935年在新生儿肠道发现，1978年确定与伪膜性肠炎有关，但直到2003年在北美引起大流行，艰难梭菌感染（CDI）才开始引起医务人员的重视。现已确定，艰难梭菌是医院感染性腹泻的主要病原菌，25％～33％的抗菌药物相关性腹泻、90％的伪膜性肠炎与之有关。CDI的疾病谱非常广泛，包括无症状携带者、自限性腹泻到中度腹泻、伪膜性肠炎，甚至是危及生命的暴发性肠炎。近年来，由于广谱抗菌药物的大量使用，放、化疗和质子泵抑制剂的使用，以及鼻胃管、灌肠等侵入性操作，艰难梭菌的感染率不断上升，尤其是自2003年北美发现高毒力菌株核糖体027型以来，因其具有更高的毒素量、更强的耐药性及传染性，感染者疾病的严重程度上升，治疗难度增加，治疗费用提高，给患者和医务人员造成了极大的挑战。快速、准确诊断CDI ，不但可以使患者获益，还能防止其在人群中引起暴发流行。早期的诊断主要靠细胞培养毒素中和实验和产毒菌株培养，但这两种方法耗时长、技术要求高，现多用于新方法的评估；直接针对细菌毒素 tcdA和／或tcdB的酶联免疫法（EIAs）因简单、快捷曾一度受到大多数实验室的青睐，但后来发现因毒素分解、表位改变等导致其敏感性不够；于是，针对细菌毒素基因tcdA、tcdB以及二元毒素基因cdt、毒素调节基因tcdC ，敏感性高、特异性好、省时又省力的核酸扩增方法开始引起重视。近年来美国食品药品监督管理局（FD A ）批准的核酸扩增方法就有10余种，很多实验室也建立了自己的实验方法。本文就近年来艰难梭菌的核酸扩增方法进行了详细阐述。
关键词： 艰难梭菌 核酸扩增 聚合酶链反应 环介导恒温扩增 依赖解旋酶的恒温扩增
