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029 心肌肌钙蛋白Ⅰ水解对免疫检测可信度的意义
文章通过不同免疫学方法分析坏死心肌和血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)水解过程对免疫检测方法的影响.使用一步夹心法的生物素化单克隆抗体(mAbs)为捕获抗体、鳌合Eu3+mAbs为检测抗体,mAbs(除6F9外)对cTnI有特异性;急性心梗(AMI)病人血清和取自四位AMI卒中捐献者的左心室组织经凝胶电泳和Western印迹了解其N末端氨基酸残基序列和cTnI及其水解片段.
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甲型流感病毒NP含量ELISA检测方法的建立
目的:建立一种双抗体夹心ELISA检测方法,以检测流感疫苗中甲型流感病毒的核蛋白(NP)含量.方法:体外重组表达NP作为ELISA法测定蛋白含量参考品,筛选捕获抗体和检测抗体工作浓度、起始浓度和系列稀释倍数,建立ELISA法并对其进行优化和验证.结果:获得的重组NP纯度为99.0%以上.建立和优化后的ELISA参数:捕获抗体4μg· mL-1,检测抗体1∶1 000.NP含量参考品起始浓度为300 ~600 ng·mL-1,四参数拟合S型曲线的决定系数R2大于0.95,对疫苗中的甲型流感病毒NP具有特异性,原液和成品的加标回收率为88.2%~ 95.3%,方法重复性(n=5)的RSD小于15%.结论:建立的流感疫苗中甲型流感病毒NP含量ELISA检测方法特异性好,准确性和精密性高,可用于疫苗样品中甲型流感病毒NP含量的检测.