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血管内皮生长因子受体结合肽文献资料
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双歧杆菌表达的重组人GrB-VRB融合蛋白诱导KDR阳性细胞凋亡
目的 在双歧杆菌中表达重组人颗粒酶B-血管内皮生长因子结合肽(GrB-VRB)融合蛋白并研究其对血管内皮生长因子受体Ⅱ(KDR)阳性细胞的作用.方法 采用电穿孔法将重组表达载体转入双歧杆菌,以ELISA和免疫印迹鉴定表达产物,以细胞增殖试验和TUNEL法分析其对KDR阳性细胞的影响.结果 工程化化双歧杆菌培养物的上清和菌体中均有重组产物,重组人GrB-VRB能有效抑制KDR阳性如人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC、小鼠结肠癌细胞株CT-26细胞增殖、细胞死亡,这种死亡的机制是细胞凋亡；但对KDR阴性细胞则无这些作用.结论 工程化双歧杆菌能分泌性表达重组GrB-VRB融合蛋白,其在VRB的靶向作用下,GrB可有效地诱导KDR阳性细胞凋亡.
关键词： 颗粒酶B 血管内皮生长因子受体结合肽 双歧杆菌 细胞凋亡 -
血管内皮生长因子受体结合肽介导颗粒酶B靶向性抗肿瘤血管生成
目的观察血管内皮生长因子受体(VEGFR)结合肽-颗粒酶B(GraB)融合蛋白抗血管生成的作用. 方法抽提人外周血淋巴细胞总RNA,进行RT-PCR克隆GraB cDNA;抽提LoVo细胞总RNA,进行RT-PCR克隆VEGFR结合肽cDNA,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物. 表达产物经亲和层析纯化后,以人血管内皮细胞(ECV304) 和鸡胚尿囊膜血管测定其生物学活性. 结果表达产物以可溶性分子形式存在于菌体中,具有良好的抗原性和特异性,且具有抑制血管内皮细胞增殖及破坏鸡胚尿囊膜血管形成的活性. 结论 VEGFR结合肽-GraB融合蛋白具有抑制血管生成的功能,在肿瘤生物靶向治疗中有一定潜在价值.
关键词： 血管内皮生长因子受体结合肽 颗粒酶B 基因克隆 原核表达
