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五指山小型猪近交系异种移植产业化研发进展
为了早日实现五指山小型猪(WZSP)近交系异种移植产业化目标,努力推进近交繁育获得近交系,同时开展克服异种移植免疫排斥和猪内源性逆转录病毒(PERV)传染生物安全性两大难题的研发内容.本文从WZSP近交系双基因敲除克隆猪繁育成功、猪-猴异种角膜内皮移植取得突破性进展、WZSP近交系PERV无传染性群体建立、WZSP近交系是理想的动物模型和异种移植供体等方面,介绍WZSP近交系异种移植产业化的研发进展.
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中国版纳近交系小型猪心脏异种抗原表位α1,3-Gal的分布
目的研究中国版纳小型猪心脏的异种抗原α1,3-Gal的分布和半定量分析,为小型猪心脏的转基因和异种移植提供资料.方法通过亲和免疫组织化学法和图像分析对10头版纳小型猪心脏进行α1,3-Gal的分布和半定研究.结果α1,3-Gal主要分布于细胞膜,细胞浆也有少量表达,胞核无表达.在小型猪心内膜、心肌间质、心外膜、神经束膜等处有α1,3-Gal分布,心肌细胞未发现α1,3-Gal分布.半定量分析发现α1,3-Gal表达量心房内膜多,心肌间质少.结论异种抗原α1,3-Gal在心脏中的表达存在较大差异,提示可以通过转基因猪来克服超急性异种排斥反应.
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中国近交系猪的氟烷基因型研究
目的选育猪到人异种移植的供器官猪种和医药实验研究大动物用猪种, 首先应筛查其是否易患猪应激综合征(PSS).方法采用聚合酶链反应结合限制性内切酶技术(PC R-RFLP)研究版纳小耳猪近交系(BMI)和近交培育之中的五指山猪(WZSP)的氟烷基因型,筛查其是否有易患猪应激综合征的可能.结果 50头版纳小耳猪近交系和15头五指山猪氟烷基因型均为阴性纯合子.结论这两种猪种可望成为猪到人异种移植和医药实验研究的理想动物.
关键词： 近交系猪 氟烷基因型 聚合酶链反应结合限制性内切酶技术 异种移植 -
中国近交系猪到人异种移植靶抗原研究
目的研究人血清对近交系猪组织的结合情况及猪组织内α-半乳糖残基(α-Gal)的分布.方法采取近交系中国版纳小耳猪4头及近交系五指山猪1头的心、肝、脾、肺、肾、胰、小肠、胸腺、皮肤、淋巴结及各级血管组织,分别以中国正常人A、B、O和AB型血清及BSI-B4为一抗或亲和物,用亲和免疫组织化学方法观察各型人血清对上述各组织的结合和组织内α-Gal的分布情况.并用α-半乳糖基酶(α-GT) 消化后,重复上述实验.结果两种近交系猪组织的血清结合及α-Gal分布情况相似.A、B、O和AB型血清与被测两种猪的各部位组织结合无明显差异,主要为各级血管内皮细胞及部分实质细胞.BSI-B4与血清结合的部位相似.软骨、外周神经、肌肉未见血清及BSI-B4结合.经α-GT消化后,人血清和BSI-B4与两种猪组织的结合反应除少数部位存在差异外,反应消失.结论对猪进行基因改造时可不考虑其抗原强弱及分布问题.α -Gal是近交系猪的主要靶抗原,但不排除存在α-Gal以外的靶抗原,通过对近交系猪基因改造克服排斥反应是较好的策略.
