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  • 集落挖掘法在抗肝癌噬菌体单链抗体库筛选中的应用

    作者:周旻;杨冬华;汤绍辉;卢筱华;黄卫;李康

    目的:建立肝癌细胞包被膜的集落挖掘法方法,探讨其在抗人肝癌噬菌体抗体库筛选中的价值. 方法: 采用"吸附-洗脱-扩增"将抗人肝癌噬菌体单链抗体库亲和富集1至4轮,再用集落挖掘法和随机挑取法检测每轮库菌克隆,筛选出能与肝癌细胞结合的阳性克隆,计算阳性克隆比例(即阳性克隆出现频率),并进行比较. 结果: 经1至4轮亲和富集后,集落挖掘法检出阳性克隆的频率分别为:0.3%、5.1%、11.5%、69.7%,而随机挑取法检出的频率分别为:0%、4.2%、8.3%、64.6%,差异无统计学意义,两者检出的阳性率一致,但前者一次检测的克隆量大、检出阳性克隆的绝对数多. 结论: 集落挖掘法是一种高效、简便、快速的筛选方法.

    关键词: 集落挖掘法 肝肿瘤

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