您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
TALEN技术文献资料
-
抑制外泌体释放对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响
目的:探讨抑制骨髓间充质干细胞外泌体的释放对其生物学特性的影响及其机制.方法:利用TALEN技术靶向性敲除Rab27a基因构建外泌体释放缺失小鼠模型,随后分离、培养并鉴定骨髓间充质干细胞,用外泌体提取试剂盒提取培养基中的外泌体,并用纳米颗粒跟踪分析(NTA)计数外泌体的数量,透射电镜观察外泌体的大小及形态.利用EdU实验及检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达来评价间充质干细胞的增殖能力.通过TUNEL染色及MTS实验检测间充质干细胞对缺氧的耐受能力.结果:敲除Rab27a的间充质干细胞释放外泌体的数量明显减少,抑制间充质干细胞外泌体的释放能显著降低其增殖及对缺氧的耐受能力.结论:抑制间充质干细胞外泌体的释放可导致其增殖能力及对缺氧的耐受能力明显降低.
-
TALEN介导的MYH9基因沉默及对细胞周期与凋亡的影响
目的：利用TALEN技术敲除人胃癌细胞系MGC803细胞株MYH9基因，观察MYH9基因沉默后细胞周期及凋亡改变。方法根据斯丹赛FastTALETM TALEN试剂盒说明书，设计并构建靶向MYH9基因的TALEN质粒对。通过质粒转染、DNA测序、RT-PCR和Western blot等检测质粒活性，成功挑取MYH9基因敲低单克隆株，并对构建好的细胞株进行周期和凋亡检测。结果成功挑选的MGC803单克隆细胞株未检测到MYH9基因完全敲除；MYH9基因敲低后，MGC803细胞周期受阻于G2/M期（P<0.05），早期凋亡增加（P<0.05）。结论利用TALEN技术成功构建MGC803细胞MYH9基因敲低单克隆株，该模型有助于后期深入探讨胃癌MYH9基因功能。
