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HPLC-MS法测定大鼠血浆与组织中薤白皂苷的含量
目的:建立测定薤白皂苷在大鼠血浆及组织中浓度的HPLC-MS方法.方法:采用液相色谱/串联四级杆质谱联用仪对薤白皂苷提取物中暴露量高的单体化合物进行检测,运用稀释比标准曲线法获取其相对血药浓度-时间曲线及相对组织药物浓度-时间曲线,计算药动学参数.结果:血浆与组织中薤白皂苷的标准曲线在0.001～1 mg/L浓度范围内线性良好,方法加样回收率为86.97％～ 116.25％.大鼠给予薤白皂苷提取物灌胃后,药时曲线呈双峰,达峰时间为30 min,半衰期约20h,其在肝肾含量较其他组织为高,脑及肺组织中未检测到该药物原型.结论:所建立的HPLC-MS方法简单、专属性强,可用于大鼠血浆及组织中薤白皂苷的含量测定.
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薤白皂苷抗大鼠血小板活化及聚集的蛋白质组学研究
目的 探讨薤白皂苷化合物对血小板活化和聚集作用的影响,探讨薤白皂苷化合物处理后的血小板差异表达的蛋白质.方法 采用流式细胞术及血小板聚集仪测定阿司匹林及不同剂量薤白皂苷化合物对二磷酸腺苷(ADP)诱导的大鼠血小板膜糖蛋白CD62P表达水平以及血小板聚集率的影响.分离对照组及优剂量组处理的血小板并提取蛋白质,采用二维凝胶电泳分离并行基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF-TOF)分析,采用Mascot软件搜索数据库,鉴定差异表达蛋白质.结果 (1)薤白皂苷高剂量组显著抑制ADP诱导的大鼠血小板膜糖蛋白CD62P表达和血小板聚集,且抑制作用呈一定量效趋势;(2)筛选出30个差异蛋白,并质谱成功鉴定7个:Calreticulin、Actin、LIM and SH3 domain protein 1、RCG55135、Protein phosphatase 1、Suppressor of IKBKE 1、Ribulose-5-phosphate-3-epimerase.结论 薤白皂苷显著抑制ADP诱导大鼠活化及聚集,差异蛋白Calreticulin、Actin、LIM and SH3 domain protein 1、RCG55135、Protein phosphatase 1、Suppressor of IKBKE 1、Ribulose-5-phosphate-3-epimerase可能在薤白皂苷抗血小板活化及聚集过程中起关键作用.
