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  • 人子宫平滑肌细胞的原代培养及应用

    作者:张荣荣;杨祖菁

    目的掌握人子宫平滑肌细胞原代培养的方法,可以籍之开展一系列的研究工作.比如进行体外药物实验,研究细胞的增殖与遗传,了解平滑肌细胞的动力学效应等许多方面.而且该方法目前在国内未见成功报道.方法用剪切胶原酶消化法分离人子宫平滑肌细胞.用DMEM和胎牛血清进行培养.传一代时用desmin和α-action单抗进行鉴定.结果经实验该法成功率高,纯度高,细胞活力好.结论用该法可以成功进行人子宫平滑肌细胞的原代培养.

  • N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激人子宫平滑肌细胞白细胞介素8表达的影响

    作者:蒋学风;曾蔚越;蒲杰;刘玉梅

    目的 探讨 N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)刺激离体培养的人晚期妊娠子宫平滑肌细胞IL-8 表达和核转录因子(NF-κB)活性的影响.方法 原代培养足月未临产的子宫平滑肌细胞,10μg/mL LPS 与经浓度分别为 0(生理盐水对照,NS)、5、10、15 mmol/L 的NAC预处理的子宫平滑肌细胞作用8 h,以及10 mmol/L的NAC或NS预处理的子宫平滑肌细胞经LPS干预0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h,收集细胞免疫印迹检测 NF-κBP65合成情况、RT-PCR 检测IL-8 mRNA表达及上清液ELISA检测IL-8浓度.结果 ①NAC 在5~15 mmol/L呈剂量依赖性抑制LPS刺激IL-8蛋白合成和mRNA表达.②随着NAC浓度由低至高,NF-κB P65合成由强到弱.差异有统计学意义(P<0.01).其变化趋势与 IL-8 mRNA 一致.结论 NAC能抑制LPS刺激晚期妊娠子宫平滑肌细胞 IL-8 蛋白合成和基因表达,可能与其抑制 NF-κB 激活有关.

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