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检测日本血吸虫病胶体碳试纸条的研制与初步应用
目的:开发一种快速检测血清中日本血吸虫抗体的免疫诊断方法.方法:用胶体碳标记日本血吸虫成熟虫卵可溶性抗原(SEA),与待测血清中日本血吸虫抗体结合,再用SEA包被在硝酸纤维素膜(NC膜)上以捕捉碳标SEA-血吸虫抗体复合物,达到检测血吸虫抗体的目的. 结果:检测137份血清,与间接血凝法(indirect haemagglutination assay,IHA)检测结果一致性为98.54%,如经IHA试剂盒检测呈阳性者即视为阳性血清,则该方法的检测敏感性为98.99%,特异性为97.37%;且检测条带的灰度与血清效价具有曲线关系,因而可以对待测血清作半定量分析. 结论:胶体碳试条层析法操作简便,快速,具有较高的敏感性和特异性,适合作血吸虫现场检测.
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疟原虫胶体碳试纸条的研制
目的 建立一种简单、灵敏的疟疾诊断方法 ,并能对疟原虫感染进行定量分析.方法 运用双抗体夹心免疫层析法,胶体碳标记间日疟原虫乳酸脱氢酶(Pv?LDH)和恶性疟原虫富组氨酸蛋白Ⅱ(Pf?HRP2)特异抗体,与疟原虫相应抗原结合,胶体碳抗原抗体复合物被NC膜上包被的疟原虫特异性抗体捕获并显色.曲线拟合疟原虫抗原浓度与对应的检测带灰度值,选取相关系数高的拟合方程式.检测不同贮存条件的试纸条灵敏度稳定性,确定佳保存条件.检测疟疾病人及健康人全血,判断试纸条与镜检法相比较的特异性、敏感性、符合率.结果 成功制作了间日疟原虫和恶性疟原虫胶体碳标记特异抗体试纸条,灵敏度分别为5、2.5 ng/ml;检测线性范围分别为5~500 ng/ml、2.5~500 ng/ml.检测带灰度值与疟原虫抗原浓度呈正相关,可对疟原虫感染定量分析.4℃保存6个月后,灵敏度基本不变.与镜检法比较,试纸条的敏感性、特异性、符合率在95%以上.结论 疟原虫胶体碳试条操作简便、快速,敏感性和特异性高,适合疟疾的快速定量诊断.
