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重组血管基膜衍生多功能肽对肺腺癌A549细胞信号蛋白磷酸化水平的影响
目的 研究重组血管基膜衍生多功能肽(rVBMDMP)对人肺肺癌A549细胞信号蛋白磷酸化水平的影响,初步探索rVBMDMP抗肿瘤作用的分子机制.方法 体外培养肺腺癌A549细胞,制备全细胞抽提液,采用信号转导抗体芯片检测rVBMDMP处理前后A549细胞信号蛋白磷酸化水平变化.结果 rVBMDM作用后磷酸化水平升高的包括黏着斑激酶FAK、细胞凋亡相关蛋白死亡受体(Fas)、死亡配体(FasL)、半胱胺酸蛋白酶蛋白(Caspase-6)、Fas相关因子1(FAF1)、和脆性组氨酸三联体蛋白(FHIT)等79个蛋白,下调的有整合蛋白αv、β1和β3、细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及核转录调节因子NF-kB等30个蛋白.结论 rVBMDMP抗肿瘤作用的分子机制可能与激活整合蛋白受体途径和死亡受体途径,以及使Bcl-2蛋白发生去磷酸化有关.
关键词： 肺癌 重组血管基膜衍生多功能肽 抗体芯片 分子机制 -
重组血管基膜衍生多功能肽抑制人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长和血管生成
目的:研究重组血管基膜衍生多功能肽rVBMDMP对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤生长和血管生成的抑制作用. 方法:体外培养人肝癌HepG2细胞和人胚肝L-02细胞,MTT法测定不同浓度的rVBMDMP对HepG2细胞的选择性抑制增殖作用;人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型治疗实验评价rVBMDMP体内抗人肝癌作用;CD31免疫组化方法分析rVBMDMP处理的HepG2裸鼠移植瘤组织微血管面积(MVA)的比例. 结果:rVBMDMP具有选择性抑制体外培养人肝癌HepG2细胞增殖作用,呈剂量依赖性,而对L-02细胞的增殖活性无明显的影响.rVBMDMP对HepG2裸鼠移植瘤生长具有显著抑制作用,呈剂量依赖性.1.0 mg/kg、3.0 mg/kg和10.0 mg/kg的rVBMDMP的肿瘤生长抑制率分别为:12.4%,55.8%和79.7%.其中10.0 mg/kg的rVBMDMP的肿瘤生长抑制率近似于20.0 mg/kg的5-氟尿嘧啶(5-FU,80.1%).rVBMDMP处理的人肝癌HepG2裸鼠移植瘤组织的CD31染色阳性区域面积百分比随着rVBMDMP浓度的增加明显降低.结论:rVBMDMP对人肝癌HepG2细胞增殖和裸鼠移植瘤生长具有显著抑制作用,同时具有抗肿瘤血管生成效应.
关键词： 肝癌 重组血管基膜衍生多功能肽 血管生成抑制剂 微血管面积 -
重组血管基膜衍生多功能肽抗血管新生活性的研究
目的:观察重组血管基膜衍生多功能肽(rVBMDMP)抗血管新生的活性.方法:采用MTT法检测rVBMDMP对血管内皮细胞增殖活性的影响,台盼蓝染色细胞计数法测定其对血管内皮细胞生长的影响,内皮管结构形成实验测定其对血管内皮细胞内皮管结构形成能力的影响,PI染色流式细胞分析术检测其对血管内皮细胞凋亡率的影响,吖啶橙染色荧光显微镜观察rVBMDMP作用后细胞凋亡形态学的改变,划痕法测定其对血管内皮细胞迁移能力的影响.结果:MTT法、台盼蓝染色细胞计数法显示rVBMDMP能显著抑制血管内皮细胞增殖和生长,其作用呈剂量和时间依赖性,1.0 μmol/L rVBMDMP作用96 h时,血管内皮细胞的活细胞数仅为溶酶对照组的50%.内皮管结构形成实验结果表明,rVBMDMP能显著降低血管内皮细胞的内皮管状结构数目(17.67±3.055与50.33±3.055).流式细胞术结果显示,rVBMDMP处理后细胞凋亡率呈浓度依赖性增加,其中1.0 μmol/L浓度组凋亡率高达14.41%.吖啶橙染色荧光显微镜下观察细胞出现典型凋亡的形态学改变.划痕法显示rVBMDMP对细胞迁移能力无明显影响.结论:rVBMDMP具有显著的抗血管新生活性.
关键词： 重组血管基膜衍生多功能肽 内皮细胞 血管新生 增殖 凋亡 -
血管基膜衍生多功能肽抗人结肠癌作用研究
目的:研究重组血管基膜衍生多功能肽VBMDMP的抗人结肠癌作用.方法:体外培养人结肠癌细胞系(SW480)细胞和中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-K1)细胞,采用MTT比色法检测重组VBMDMP对SW480细胞选择性抑制增殖作用;胎盼蓝染色细胞计数法检测重组VBMDMP对SW480细胞和CHO-K1细胞生长曲线的影响;人结肠癌(SW480)细胞裸鼠异种移植瘤模型治疗实验观测重组VBMDMP体内抗人结肠癌作用.结果:重组血管基膜衍生多功能肽具有选择性抑制体外培养人结肠癌细胞系SW480细胞增殖和生长作用,呈剂量依赖性.而对CHO-K1细胞的增殖活性影响小.重组血管基膜衍生多功能肽对SW480细胞裸鼠异种移植瘤生长具有显著抑制作用,呈剂量依赖性.1 mg/kg、5 mg/kg和10 mg/kg重组VBMDMP的肿瘤生长抑制率分别为:63%,79%和83%;瘤重抑制率分别为:62%,66%和75%.其中10 mg/kg重组VBMDMP的肿瘤生长抑制率和瘤重抑制率均接近100 mg/kg环磷酰胺(CTX),高于20 mg/kg血管生成抑制剂烟曲霉素衍生物TNP-470.结论:重组血管基膜衍生多功能肽对人结肠癌细胞增殖和生长具有显著抑制作用.
关键词： 结肠肿瘤 重组血管基膜衍生多功能肽 治疗作用
