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共免疫沉淀反应文献资料
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hDaXX与12型腺病毒E1B55KD癌蛋白在体内外的结合反应
目的研究12型腺病毒(Adenovirus 12,Ad12)E1B 55KD癌蛋白(Ad12 E1B 55KD)打破hDaxx与急性早幼粒细胞性白血病蛋白(promyelocytic leukemia protem,PML)在细胞核共定位的机制.方法构建hDaxx原核细胞表达质粒pQE30/hDaxx,并在大肠杆菌(E.coli)BL21中诱导表达,用镍一氮基三乙酸(Ni-NTA)琼脂糖加以纯化.通过体内外共免疫沉淀反应,Western blot方法研究hDaxx与Ad12 E1B 55KD直接结合反应. 结果质粒pQE30/hDaxx在E.coli BL21中成功诱导表达了hDaxx,其N端有6个组氨酸分子附着(6His-hDaxx).Western blot结果显示hDaxx在体内外与Ad1 2 E1B 55KD发生直接结合反应.结论表达并获得纯化的6His-hDaxx,hDaxx能在体内外与Ad12 E1B55KD直接结合.
关键词： hDaxx Ad12 E1B 55KD癌蛋白 共免疫沉淀反应
