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大鼠骨髓源性间充质干细胞对内皮细胞增殖及成管的影响
目的 观察大鼠骨髓源性间充质干细胞(MSCs)对内皮细胞(ECs)增殖及成管能力的影响.方法 采用密度梯度离心、流式细胞仪及免疫荧光的方法将不同培养条件下(DMEM及EGM-2培养液)大鼠骨髓源性单核细胞(BM-MNCs)进行分离及鉴定,并对直接和间接共培养(Transwells)的细胞进行体外成管和免疫荧光统计分析.结果 与DMEM中的细胞比较,EGM-2培养的BM-MNCs能够形成典型的集落形成细胞.流式细胞仪检测和免疫荧光鉴定表明培养在DMEM和EGM-2中的细胞分别为MSCs(CD105、CD90和CD73表达率大于95％)和ECs(CD31阳性率大于90％).与间接共培养比较,直接共培养后细胞的成管数量及长度均显著降低(P＜0.05).免疫荧光染色进一步证明,直接共培养后ECs的数量湿著减少(P＜0.05).结论 直接共培养下,大鼠MSCs能够抑制ECs的增殖及成管.
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聚合物／液晶细胞模型的构建及其表面弹性对大鼠骨髓干细胞黏附的影响
目的：构建聚合物／液晶细胞模型，探究其表面弹性对大鼠骨髓干细胞黏附情况的影响。方法：溶剂挥发致相分离方法构建聚合物／液晶细胞模型，通过偏光显微镜、扫描式电子显微镜及X射线衍射观察细胞模型的表面特征。全骨髓细胞贴壁培养法分离大鼠骨髓间充质干细胞（ BMSCs），通过表面因子检测和诱导其成骨成脂分化进行鉴定。培养3代后分4组：纯PU空白对照组，10％膜组，30％膜组和50％膜组。接种细胞密度为5×107／L，待细胞贴壁24h后作细胞骨架染色处理，激光共聚焦显微镜观察细胞附着在材料上的情况并拍照。结果：溶剂挥发致相分离方法成功构建3种不同硬度的聚合物／液晶细胞模型；表面因子检测显示CD29、CD44、CD90呈阳性表达，而CD34和CD45呈阴性表达；经过茜素红S染色和油红O染色，成骨成脂分化形成的钙结节和脂滴都显而易见；细胞骨架染色拍摄结果显示，纯PU对照组、10％膜组和30％膜组上的细胞铺展面积较广，肌动蛋白微丝和细胞核清晰明显；而50％膜组的细胞铺展面积较小，细胞核虽较清晰，但是肌动蛋白微丝却模糊不清。结论：合适液晶含量的聚合物／液晶生物膜能支持大鼠骨髓干细胞的贴壁生长，而液晶含量过高则抑制细胞的贴壁生长。
关键词： 聚合物/液晶细胞模型 大鼠骨髓干细胞 细胞骨架染色
