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上调叉头框转录因子M1基因对人肿瘤细胞迁移侵袭及上皮-间充质转化的影响
目的 探讨上调叉头框转录因子M1(FoxM1)基因对人卵巢癌细胞迁移侵袭的影响及其分子机制.方法 构建FoxM1过表达慢病毒载体.HO-8910细胞分为3组,空白对照组、空载对照组和FoxM1慢病毒过表达组.转染HO-8910细胞后,采用Western blot方法观察FoxM1蛋白表达,采用划痕修复试验检测癌细胞迁移能力,采用Transwell方法检测癌细胞侵袭能力,采用Western blot法检测癌细胞E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白水平.结果 与空白对照组和空载对照组比较,FoxM1过表达组FoxM1蛋白明显升高.划痕修复试验结果显示,空白对照组、空载对照组和FoxM1过表达迁移细胞迁移距离分别为(156.80 ±2.26)、(161.60±1.81)和(278.60±2.62) μm.统计学分析发现,与空白对照组比较,P <0.01;Transwell侵袭试验显示,空白对照组、空载对照组和FoxM1过表达迁移细胞数分别为(68.56±1.69)、(67.27±1.36)和(126.38 ±1.56)个.统计学分析发现,与空白对照组比较,P<0.01.Western blot结果显示,与空白对照组比较,FoxM1过表达细胞组E-钙黏蛋白表达降低,而N-钙黏蛋白表达增高.结论 FoxM1过表达可促进人卵巢癌细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与促进上皮-间充质转化有关.
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FOXK1对肝癌高转移细胞系Huh7侵袭和迁移能力的影响
目的 探讨叉头框转录因子1(FOXK1)对肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力的影响.方法 采用实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测40例肝癌组织及其癌旁正常组织FOXK1 mRNA的表达,qRT-PCR和Western blot检测正常肝细胞HL7702、肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白的表达.小RNA干扰技术下调FOXK1表达后,qRT-PCR和Western blot检测肝癌高转移细胞Huh7 FOXK1 mRNA和蛋白的表达,Transwell实验检测其侵袭和迁移能力.结果 qRT-PCR检测结果显示,肝癌组织中FOXK1 mRNA的表达高于癌旁正常组织(2.87±-0.21 vs 1.35±0.11,P=0.004);qRT-PCR和Western blot检测结果显示,相比正常肝细胞HL7702,肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.001).下调FOXK1表达后,肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01),侵袭和迁移细胞数目明显减少(P<0.01).结论 下调FOXK1表达能抑制肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力.
关键词: 肝肿瘤 叉头框转录因子1 肝癌高转移细胞Huh7 迁移 侵袭