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人脐带沃顿胶对脑外伤小鼠的神经修复作用
目的 观察人脐带沃顿胶(WJ)对脑外伤小鼠的神经修复作用.方法 采用小鼠CCI脑外伤模型建立动物模型,将实验小鼠随机分为Veh和WJ移植组.术后3d,干湿称重法检测小鼠损伤侧脑含水量,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-10的表达,碘化丙锭(PI)染色检测损伤附近区域坏死细胞数量;术后28 d,神经功能缺损评分评价小鼠运动功能,新物体识别实验检测小鼠认知功能,糖水偏好实验评价小鼠抑郁状况,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测神经元特异性相关蛋白和神经营养因子表达.结果 (1)WJ移植组小鼠脑含水量[(84.61±1.61)％]与Veh组比较[(11.06±2.24)％]明显降低,差异有统计学意义(t=4.935,P=0.001).(2)小鼠神经功能缺损评分结果显示WJ移植组术后第7、14、21、28天神经功能缺损评分[(11.80±1.30)、(10.60±1.14)、(9.40±1.14)和(8.20±1.30)分]与Veh组比较有统计学意义[(9.80±1.09)、(8.40±1.14)、(7.20±1.09)和(5.80±0.84)分,P =0.000].(3)小鼠新物体识别实验结果显示WJ移植组小鼠新物体辨别率为(65.57±1.543)％,高于Veh组[(50.03±1.704)％],差异有统计学意义(t=6.760,P=0.000).(4)糖水偏嗜实验表明WJ移植组和Veh组比较差异有统计学意义[(63.05±2.10)％和(48.62±1.80)％,t=4.935,P=0.001].(4)WJ移植组抑炎因子IL-10表达量[(659.39±14.40) pg/ml]明显高于Veh组[(554.39±15.54) pg/ml,t=4.957,P=0.008],而促炎因子TNF-α(755.90±16.89) ng/ml明显低于Veh组[(1 081.22±14.81) ng/ml,t=14.480,P=0.000].(5)WJ移植组神经元特异性相关蛋白微管相关蛋白-2(MAP-2)、双皮质蛋白(DCX)和神经营养因子脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达(0.94±0.18、1.38±0.06、1.02±0.02和0.85±0.67)明显高于Veh组(0.41±0.03、0.81±0.04、0.52±0.03和0.23 ±0.03),差异有统计学意义(=2.900,P=0.044;t=8.007,P=0.001;t=13.060,P=0.000;=8.640,P=0.001).(6)对比Veh组[(321.60±17.98)个],WJ移植组的坏死细胞数量显著减少[(179.60±18.95)个],差异有统计学意义(t=5.435,P=0.001).结论 人脐带沃顿胶对脑外伤小鼠有神经修复作用.
