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脓毒症血清对人肺血管内皮细胞NF-kB表达的影响
目的:观察严重脓毒症患者血清对人肺血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cell,PMVECs) NF-kB表达的影响,探讨严重脓毒症致急性肺损伤的发生机制.方法:随机将离体培养PMVECs分为3组:正常培养组(加入10％胎牛血清,A组)、健康血清组(加入10％健康人血清,B组)、患者血清组(加入10％严重脓毒症患者血清,C组),分别于刺激0、1、2、4、6h免疫组化观察离体PMVECs NF-κB表达并测定各组平均光密度(average optical density,AOD)值；ELISA法检测培养上清液分泌的TNF-α水平；比较不同时相3组PMVECs上述指标变化.结果:与A组及B组相比,C组PMVECs胞核NF-κB呈强阳性表达,且1 h AOD值达高峰,后逐渐下降(0.523±0.012,0.498±0.009,0.444±0.030)；ELISA显示:不同时相A组与B组TNF-α水平均无明显差异(P＞0.05),C组与A组、B组相比各时间点TNF-α水平均明显升高,且均有显著差异(P＜0.01).结论:严重脓毒症患者血清可通过活化NF-κB启动分泌TNF-α,这可能是严重脓毒症致急性肺损伤的一个重要通路.
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脓毒症血清对人肺血管内皮细胞损伤的实验研究
目的:探讨严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞(PMVECs)的机制.方法:随机将离体培养PMVECs分为3组:正常培养组(N组)加入10％胎牛血清、健康组(H组)加入10％健康人血清、患者血清组(S组)加入10％严重脓毒症患者血清,分别于刺激0、1、2、4、6hMTT比色法检测PMVECs增殖活性,测定吸光度(OD);免疫组化观察NF-κB表达,测定平均光密度(AOD);透射电镜观察细胞超微结构;比较不同时相3组PMVECs上述指标变化.结果:各组不同时间点PMVECs的OD值有差异(P＜0.01),OD值的变化趋势有差异(P＜0.01).与N组及H组相比,S组1 hOD值明显降低(P＜0.01),随患者血清刺激时间延长,S组OD值维持在较低水平.NF-κB免疫组化检测示S组1hAOD值达高峰,后逐渐下降(0.523±0.012,0.498±0.009,0.444 ±0.030).透射电镜示N组与H组电镜下未见明显亚显微结构变化,S组1h可见PMVECs微绒毛减少,内质网扩张,WPBs小体减少,6h可见PMVECs胞膜断裂,微绒毛消失,线粒体呈空泡性变,核周隙增宽,胞间可见囊泡状改变.结论:严重脓毒症患者血清可损伤离体PMVECs,NF-κB活化可能是严重脓毒症致急性肺损伤的一个重要环节.
