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葡萄糖刺激下小鼠胰岛素分泌时相及胰岛素囊泡的分布变化
目的 探讨葡萄糖刺激下小鼠胰岛素的动态分泌及胰岛素囊泡的分布变化.方法 雄性C57BL小鼠50只,处死后分离小鼠胰岛,采用免疫荧光法孵育,镜下观察小鼠胰岛β细胞分布情况;取50个胰岛在含2.8 mmol/L及16.7mmol/L葡萄糖的低糖和高糖KRBH缓冲液中灌流,采用放射免疫法分析胰岛素的动态分泌;另取60个胰岛分为低糖组与高糖组各30个,分别采用低糖和高糖KRBH缓冲液孵育5 min,电镜下观察2组胰岛素分泌囊泡密度、分布及未成熟囊泡情况.结果 小鼠胰岛β细胞位于胰岛中央;胰岛素第1时相分泌呈典型峰状,AUC为4.924±0.536,第2时相分泌呈平台样均匀分泌,A UC为11.180±0.690;低糖组胰岛素囊泡密度、距离β细胞膜>50~300 nm、>300 nm胰岛素分泌囊泡密度和未成熟胰岛素分泌囊泡密度((213.3±10.2)、(41.4±1.96)、(152.4±9.52)、(2.9±0.21)个/0.1 μm2)明显低于高糖组((249.7±4.2)、(58.9±2.6)、(172.7±4.99)、(6.04±0.98)个/0.1 μm2)(P<0.05),距离β细胞膜<50 nm胰岛素分泌囊泡密度((19.6±0.7)个/0.1 μm2)与高糖组((18.1±0.94)个/0.1 μm2)比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 葡萄糖刺激下的小鼠胰岛素第1时相分泌呈典型峰状,第2时相分泌呈平台样分泌;高糖刺激5 min,胰岛素分泌囊泡合成增多,其中锚定囊泡分布无明显增多,但可释放池囊泡及储备池囊泡明显增多.