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人PIF1文献资料
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人PIF1全长基因及其截短体真核表达载体的构建及鉴定
目的 构建人PIF1基因5’端、3’端及全长基因的真核表达载体.方法 从pCR2.1-TOPO-PIF1原始质粒中,采用PCR方法扩增目的基因PIF1,PIF1N及PIF1C,将目的基因和目的载体pcDNA3.1(-)分别酶切;纯化酶切产物后定向连接,并将其转化大肠杆菌DH5α,对生长出的克隆行特异限制性内切酶酶切鉴定,鉴定为阳性的克隆送样测序.结果 凝胶成像结果显示重组基因pcDNA3.1(-)-PIF1,pcDNA3.1(-)-PIFIN及pcDNA3.1(-)-PIF1C酶切后条带大小分别为1 926,540,1 428 bp.结论 成功构建hPIF1基因5’端、3’端及全长基因表达载体,分别为pcDNA3.1(-)-PIF1N,pcDNA3.1(-)-PIF1C及pcDNA3.1(-)-PIF1.
关键词： 解螺旋酶 人PIF1 质粒构建 pcDNA3.1(-)
