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趋化因子CXCL13对TNF-α诱导的人骨关节滑膜细胞RANKL表达的影响
目的 探讨趋化因子CXCL13对TNF-α诱导的人骨关节滑膜细胞调控细胞核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响.方法 ①体外培养人骨关节滑膜细胞,并给予10μg/mL TNF-α处理,分别在培养0、6、12、24h时采用免疫荧光法检测CXCL13表达.②人滑膜细胞给予10 μg/mL TNF-α处理24h,将培养液更换为含0、5、10、25 ng/mL CXCL13的培养液继续培养24 h,或将培养液更换为含25 ng/mL CXCL13的培养液分别作用0、1、3、6、24 h;以不加TNF-α及CXCL13处理的常规培养细胞作为对照细胞.收集各浓度、各时间点细胞,采用Western blotting法检测RANKL蛋白相对表达量.结果 ①TNF-α作用0、6、12、24 h时细胞CXCL13相对表达量(荧光强度)分别为0.907±0.350、0.823±0.730、0.710±0.660、0.653±0.850,组间比较P均＜0.05.②对照细胞RANKL蛋白相对表达量为0.956±0.014,25 ng/mL CXCL13处理0、1、3、6、24h时RANKL蛋白相对表达量分别为1.543±0.047、1.366±0.026、0.883±0.026、0.367±0.034、0.246±0.015;0、5、10、25 ng/mL CXCL13作用24h时RANKL蛋白相对表达量分别为0.287±0.007、0.189±0.008、0.069±0.004、0.022±0.002;上述各组、各时间及各浓度细胞比较P均＜0.05.结论 趋化因子CXCL13能够在一定浓度和时间内抑制TNF-α诱导的人骨关节滑膜细胞RANKL蛋白表达.
