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靶向沉默Gata3对妊娠期哮喘小鼠树突状细胞表型及效应T细胞失衡表达的影响
目的：研究慢病毒介导siRNA靶向沉默Gata3基因表达对妊娠哮喘模型小鼠骨髓来源树突状细胞( DC )抗原递呈及其免疫生物学特性的影响。方法：以脂质体DNA沉淀法将重组慢病毒干扰质粒与包装质粒共转染AD293细胞,包装生成慢病毒感染体外诱导DC,RT-PCR、Western blot分析其对siGata3基因的整合转录效果；流式细胞术观察细胞表型变化。通过尾静脉注射将pSH1/siGata3转移至小鼠体内,ELISA法测定其肺泡灌洗液( BALF)中的炎性因子含量；MTT法验证混合淋巴细胞反应( MLR)后T细胞增殖能力。结果：经重组、包装携有Gata3特异siRNA慢病毒感染DC成功,其siRNA靶点Gata3 mRNA及蛋白的转录表达分别下调87.30%和81.33%( P<0.05)；同时降低DCs膜表面CD86荧光强度( P<0.05)。减少pSH1/siGata3组小鼠BALF中IL-5、IL-17分泌而提升IL-12水平( P<0.05)；MLR 证实,共培养感染 DC 激活 T 细胞的能力明显不足( P<0.05)。结论：siRNA干扰可有效抑制模型小鼠免疫微环境特定Gata3通路,阻遏T细胞及其亚群分化由此来诱导DC免疫耐受,为妊娠期哮喘防治奠定基础并提供新的思路和手段。
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鼻腔滴入IFN-γ对AR大鼠鼻腔黏膜中GATA-3表达的影响及意义
目的 探讨鼻腔吸入IFN-γ对大鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用及其机制. 方法将32只大鼠随机分为四组,各8只.A组为阴性对照组.B、C、D组采用卵清蛋白、氢氧化铝建立大鼠AR模型,B组为阳性对照组、C组为IFN-γ治疗组、D组为丙酸倍氯米松治疗对照组.B、C、D组于模型建立后第31～38天,每只每日每侧鼻腔分别滴入PBS 50 μl、IFN-γ 1μg和丙酸倍氯米松3.5 μg.第39 天取鼻腔黏膜,观察鼻腔组织病理学改变,用免疫组化SP法检测转录因子GATA3. 结果与A组相比,B组鼻黏膜充血、水肿,黏膜层增厚,有嗜酸细胞为主的炎性细胞浸润,GATA3表达增加;C、D组上述炎性改变明显减轻,鼻黏膜中GATA3表达减少. 结论鼻腔滴入IFN-γ治疗AR可能与阻断GATA3表达,从而继发抑制Th2型反应有关.
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SLE患者PBMCs中T-bet、GATA3和Foxp3 mRNA的表达变化及意义
目的 检测系统性统斑狼疮(SLE)患者单个核细胞(PBMCs)中转录因子T-bet、GATA3和Foxp3表达情况,并探讨其意义.方法 采集系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs),提取总RNA,利用SYBR GreenⅠ逆转录荧光定量PCR方法 ,以β-actin为内对照基因,检测PBMCs中T-bet、GATA3和Foxp3 mRNA的相对表达水平.结果 SLE患者PBMCs中T-bet 、GATA3、Foxp3 mRNA表达水平低于正常对照组,且活动期高于稳定期.结论 SLE患者PBMCs中转录因子T-bet、GATA3和Foxp3表达降低;三者可能参与SLE的发病机制.
