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循环miRNA-93在DHEA多囊卵巢综合征大鼠模型中的表达及其意义
目的:通过检测多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠血清与卵巢组织中miRNA-93及血管内皮生长因子A(VEGFA)的表达水平,探讨循环miRNA-93及靶基因VEGFA在PCOS发生发展过程中的作用机理与诊断价值.方法:选取3~4周龄雌性(SD)大鼠,随机分为实验组和对照组,每组20只.实验组每日颈背部皮下注射脱氢表雄酮(DHEA),按6mg/100g剂量溶于0.2ml无菌注射用油;对照组每日颈背部皮下注射0.2ml无菌注射用油剂.28天后观察两组大鼠的动情周期、卵巢形态学、性激素、体重、卵巢体积、OGTT血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及血脂等代谢相关指标的变化.RT-PCR法检测大鼠血清和卵巢组织中miRNA-93表达,ELISA法检测血清中VEGFA表达,IHC、Western blot法分析卵巢组织中VEGFA蛋白表达量.结果:实验组大鼠失去规律的动情周期,卵巢体积增大,呈多囊样变,血清FSH、T、LH升高,糖耐量异常,空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数明显高于对照组,血清胆固醇、甘油三酯高于对照组,PCOS大鼠模型构建成功.RT-PCR、ELISA、Western blot、IHC等结果显示,miRNA-93及靶基因VEGFA在PCOS大鼠模型的血清、卵巢组织中表达一致且显著升高(P<0.05).结论:miRNA-93在PCOS大鼠模型血清和卵巢组织中呈高表达,可能通过调控其靶基因VEGFA在PCOS发生发展中起重要作用,在PCOS诊断中循环miRNA-93可能作为一种新型非侵入性的诊断标记物.
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miR-126修饰的间质干细胞来源的外泌体对大鼠早期缺血性股骨头坏死的影响
目的 观察微小RNA-126(miR-126)修饰的间质干细胞来源的外泌体(MSC-126-Exos)对类固醇激素诱导的早期缺血性股骨头坏死(SANFH)的治疗作用,并探讨其潜在机制.方法 分别以80 mg/L MSC-126-Exos和MSC-Exos处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)并设PBS处理组为对照,MTT、划痕实验以及成管实验分别观察各组细胞增殖、迁移和毛细血管网的形成,Western blot检测HUVECs中血管内皮生长因子A(VEGFA)的表达.构建大鼠SANFH模型,分别注射等量MSC 126-Exos、MSC-Exos和PBS,6周后,通过对股骨头区域组织进行CD31免疫荧光染色及其Micro-CT扫描,观察股骨头血管数量及骨质情况.结果 体外实验中,MSC-126-Exos组的HUVECs的增殖、迁移和成管较MSC-Exos组显著增强,且VEGFA的表达水平也上调,差异有统计学意义(P＜0.05).在体实验中,MSC-126-Exos组大鼠股骨头坏死区CD31免疫荧光标记的血管数量较MSC-Exos组和模型组显著增多(P＜0.05),且股骨头坏死区Micro-CT扫描显示MSC-126-Exos组的小梁厚度(Tb.Th)、小梁数(Tb.N)和每组织体积骨量(BV/TV)值也显著高于MSC-Exos组和模型组,而小梁分离度(Tb.Sp)显著降低(P＜0.05).结论 MSC-126-Exos可以促进内皮细胞功能,改善股骨头区的血运从而增强骨质沉积,对大鼠SANFH具有显著的治疗效果.
