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  • 人心脏干细胞向心肌细胞分化的研究

    作者:侯红;吕安林;达晶;侯兆蕾

    研究了5-AZA、Ang II 及其联合诱导人心脏干细胞向心肌细胞分化和提高分化率的方法。经患者或家属同意,从心外科手术中获取人心脏右心耳组织,Ⅱ型胶原酶消化、培养、传代,选用 P2~P8细胞与心脏干细胞抗体 CD117(c -kit)结合后,经流式细胞仪无菌分选纯化心脏干细胞,对分选纯化后的 c -kit +CSCs 进行培养(见前期试验)。选取无菌分选纯化后 c -kit +CSCs 进行诱导、分化实验。实验随机分为四组:对照组(普通心脏干细胞培养液)、5-AZA 诱导组、Ang II 诱导组、5-AZA 和 Ang II 联合诱导组。4周后用 Western Blotting 测定心肌细胞特异性蛋白 cTn I、Cx43的表达;用流式细胞仪测定各组心肌细胞分化率。人心脏干细胞诱导4周后,Western blotting 结果显示,四组均有 cTn I、Cx43表达,对照组表达弱,5-AZA和 Ang II 联合组表达强。人心脏干细胞诱导4周后流式细胞仪测定各组心肌细胞分化率,统计结果显示:对照组(27.86±4.52)%、5-AZA 组(52.71±7.40)%、Ang II 组(40.48±7.02)%、5-AZA 和 Ang II 联合组(64.74±6.11)%;四组间均有统计学差异(P <0.05)。5-AZA 、Ang II 均能诱导人 c -kit +CSCs 分化为心肌细胞,5-AZA 和 Ang II 联合诱导的心肌细胞分化率高于5-AZA、Ang II 单独诱导方案。

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