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半夏生物碱含量测定及其对豚鼠离体肠管运动的影响
目的:观察半夏生物碱对豚鼠离体肠管运动的影响,探讨其止呕的作用机制.方法:提取半夏生物碱并测定其含量,以呕吐相关受体激动剂乙酰胆碱(Ach)、组胺磷酸盐(His)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)为工具药,以豚鼠离体回肠收缩张力为指标,观察半夏生物碱对离体回肠运动的影响.结果:半夏生物碱能够剂量依赖性地抑制离体回肠自主收缩,使肠管收缩平均张力降低;能明显拮抗Ach、His、5-HT的兴奋肠管作用,使收缩张力显著降低;能明显拮抗DA的松弛肠管作用,使张力升高.结论:半夏生物碱可抑制离体肠管运动,其机制可能是阻断M受体、H1受体、5-HT受体、DA受体,也可能是对肠管平滑肌的直接抑制作用.
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半夏生物碱对豚鼠离体回肠5-HT3受体与NK1受体的影响
目的:观察半夏生物碱对不同工具药干预下豚鼠离体回肠运动的影响,探讨其防治化疗性恶心呕吐的机制.方法:分别以5-羟色胺(5-HT)、选择性5-HT3受体激动剂2-甲基-5-羟色胺(2-Methylserotonin,2-Methyl-5-HT)、P物质(substance P,SP)和选择性NK1受体激动剂GR73632作为工具药,利用离体恒温浴槽,观察半夏生物碱在上述工具药存在条件下对豚鼠离体肠管收缩的影响.结果:半夏生物碱可以拮抗5-HT及选择性5-HT3受体激动剂2-Methyl-5-HT、SP及选择性NK1受体激动剂GR73632对肠管的兴奋作用,使肠管收缩张力显著降低,并且对上述4种受体激动剂的拮抗作用呈现一定程度的剂量依赖性.结论:半夏生物碱对回肠上的5-HT3受体与NK1受体具有一定阻断作用.半夏生物碱是半夏止吐的主要有效部位,阻断5-HT3受体与NK1受体可能是半夏防治化疗性恶心呕吐的重要机制之一.
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半夏生物碱诱导人肾细胞癌786-0细胞凋亡及其对葡萄糖转运蛋白78表达的调控
目的 观察半夏生物碱对786-0细胞株的凋亡诱导作用,并探讨其可能作用机制.方法 将786-0细胞株与半夏生物碱(400、200、100 μg/ml)共同培养48 h;细胞计数试剂盒(cell counting ldt-8,CCK-8)法测定细胞活性;流式细胞法检测细胞的凋亡率;蛋白免疫印迹法及实时定量聚合酶联反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测细胞内葡萄糖转运蛋白78的表达;免疫组织化学法检测细胞中Bad的蛋白表达.结果 与阴性对照组比较,干预组细胞活性下降(P＜0.01)并发生明显的凋亡现象,差异具有统计学意义(P＜0.05);免疫蛋白印迹法及实时定量PCR法检测发现,半夏生物碱干预各组中葡萄糖转运蛋白78表达明显下降(P＜).05);免疫组织化学结果提示,半夏生物碱亦能上调Bad蛋白在细胞内的表达.结论 半夏生物碱能通过抑制葡萄糖转运蛋白78的表达,并能上调Bad蛋白的表达,从而促进人肾细胞癌的凋亡.
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半夏生物总碱对人肝癌细胞增殖的影响
目的:研究半夏生物总碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响.方法:采用MTT比色法以及集落形成率来测定半夏生物碱对Bel-7402生长抑制作用.结果:半夏生物碱400,200,100 μg·ml-1对肝癌细胞Bel-7402有明显抑制作用(P＜0.05或0.01),随着半夏生物碱浓度的增加和共同培养时间的延长,抑制作用逐渐增强.结论:半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402生长有一定的抑制作用.
关键词： 半夏生物碱 BEL-7402肿瘤细胞 -
半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响
目的:研究半夏生物碱对人肝癌细胞Bel-7402增殖的影响.方法:将Bel-7402与半夏生物碱(400、200、100 μg·mL-1)共同培养,采用MTT比色法测定半夏生物碱对Bel-7402增殖的影响,TUNEL技术检测其对Bel-7402细胞凋亡的影响,免疫组化SABC染色法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达情况.结果:作用24h后,半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100 μg·mL-1)对Bel-7402增殖有显著抑制作用,且抑制作用随着药物浓度增加而加强,高抑制率可达到36.98％.TUNEL结果显示,半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100 μg·mL-1)能有效诱导Bel-7402细胞凋亡,且呈量效关系.半夏生物碱高、中、低剂量(400、200、100 μg·mL-1)可使Bax表达显著升高而Bcl-2表达显著下降.结论:半夏生物碱对Bel-7402生长有一定的抑制作用,可诱导其凋亡,其作用机制可能为上调Bax和下调Bcl-2.
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均匀设计法优化小半夏加茯苓汤效用组分配比实验研究
目的：应用均匀设计方法优化小半夏加茯苓汤效用组分的配比。方法：建立H22荷瘤小鼠模型，将小鼠随机分为5组，按照均匀设计要求给予不同配比的半夏生物碱、茯苓多糖及姜辣素。连续给药10d后，次日处死。运用均匀设计方法，以瘤重为疗效指标，对数据进行处理。得到优配比后，另增原方汤剂组、顺铂组、模型组和空白对照组各一组，将小鼠随机分为5组，连续给药10d后，次日处死。计算抑瘤率，检测对机体免疫功能的调节作用，对优配比组方疗效进行验证。结果：由均匀设计方法得到瘤重回归方程（y＝0.556＋0.06A＋2.091B－0.271C，r＝0.079），其中当组方中茯苓多糖为0.005mg、姜辣素为0.195mg时瘤重低。优配比组方可反映原方汤剂的疗效，对移植瘤的生长发挥一定的抑制作用（P＜0.01）；同时与顺铂组相比，可提高小鼠免疫器官指数及血清中TNF－α、IL－2的浓度（P＜0.01）。结论：经过均匀设计法确定小半夏加茯苓汤的效用组分用量的优化配比，组方体现了一定的肿瘤抑制及免疫调节作用，便于对该方诱导肿瘤细胞凋亡的机制进行深入研究，有望用于肿瘤放化疗的辅助及预后治疗。
