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旋转超滤法文献资料
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iPSC-MSC来源的外泌体对LPS刺激肺泡巨噬细胞产生炎性因子的影响
目的：探讨iPSC－MSC来源的外泌体（exosome，Exo）对LPS刺激的肺泡巨噬细胞释放炎性因子的作用。方法采用旋转超滤法提纯iPSC－MSC外泌体，以无外泌体培养基培养肺泡巨噬细胞NR8383，分别给予Exo(50μg/ml)、LPS(50ng/ml)、LPS(50ng/ml)+Exo(50μg/ml)培养24h，以不含 Exo 和 LPS 培养为对照组，利用酶联免疫标记法（ELISA）检测各组上清液中TNF－α、IL－1β、IL－6蛋白浓度。结果提取物经透射电镜观察为圆形或半圆形囊泡，直径40~100nm，表达Exo标志物CD9和CD63；LPS组上清液中TNF－α、IL－1β和IL－6的浓度（435．38±36．31pg/ml、319．76±39．14pg/ml和408．33±43．44pg/ml）与空白对照组（37．48±8．75pg/ml、33．51±7．88pg/ml和37．73±8．46pg/ml）和Exo组（38．71±9．14pg/ml、32．05±6．81pg/ml和42．84±6．54pg/ml）比较显著上调（P＜0．01）；LPS+Exo 组TNF－α、IL－1β和IL－6的浓度（369．30±32．74pg/ml、249．23±36．77pg/ml 和328．91±46．45pg/ml）与LPS组相比，明显减少（P＜0．05）；空白对照组与Exo组的TNF－α、IL－1β和IL－6的浓度无显著性差异。结论成功富集Exo；iPSC－MSC来源的Exo可抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞表达炎性因子。
