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肾上腺髓质素在肾间质纤维化实验小鼠肾脏细胞增殖中的作用
目的 探讨肾上腺髓质素(ADM)在梗阻性肾病中对细胞增殖的影响.方法 采用单侧输尿管结扎(UUO)的方法制备梗阻性肾病模型,给予缬沙坦10 mg·kg-1·d-1灌胃治疗,采用免疫组化及RT-PCR检测野生小鼠(WT)和肾上腺髓质素基因敲除小鼠(AMKO)肾脏增殖细胞核抗原(PC NA)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和转化生长因子β1( TGF-β1)的表达.结果 野生UUO组小鼠与假手术组相比PCNA阳性细胞数增加, 缬沙坦能减少PCNA阳性细胞数.与野生小鼠比较,AMKO假手术组PCNA阳性细胞明显增多,AMKO-UUO组尤为明显,缬沙坦能减少AMKO-UUO组的PCNA阳性细胞数,Ⅲ型胶原和 TGF-β1的蛋白表达与mRNA在AMKO-UUO组明显上调,可被缬沙坦拮抗.结论 肾上腺髓质素在UUO介导的肾间质病变的细胞增殖过程中有着重要的作用.
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超声弹性对比指数在单侧输尿管结扎大鼠肾脏纤维化程度评估中的应用价值
目的 探讨超声弹性对比指数(elasticity contrast index,ECI)对单侧输尿管结扎模型大鼠肾脏纤维化程度的评估价值.方法 SD大鼠24只随机分为假手术组6只和模型组18只(术后3、7、14 d各6只),模型组行右侧输尿管结扎术,假手术组仅分离输尿管但不结扎.假手术组术后14 d,模型组术后3、7、14 d应用体积分数5％水合氯醛腹腔注射麻醉后,先行超声检查测量ECI,再处死大鼠取右肾组织行Masson染色及肾脏纤维化程度评分.结果 模型组术后14 d时ECI(1.20±0.18)高于假手术组(0.59±0.09) (P＜0.05),术后3、7d时ECI(0.62±0.10、0.68±0.12)与假手术组比较差异无统计学意义(P＞0.05);模型组术后3、7、14 d时肾脏纤维化程度评分(2.56±0.73、4.35±0.84、6.93±0.72)均高于假手术组(0)(P＜0.05),且模型组术后3、7、14 d时肾脏纤维化程度评分比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 ECI可反映大鼠肾脏纤维化的程度,可作为评估肾脏纤维化的半定量指标.
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川芎嗪对肾间质纤维化中TGF-β1/miR-29表达的影响
目的:观察川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠模型肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)、间质损伤及TGF-β1/miR-29表达的影响.方法:50只雄性Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组(Ctrl组)、假手术组(Sham组)、模型组(UUO组)、缬沙坦组(VAN组)和TMP组各10只.经相应处理后,通过HE,Masson染色观察肾组织的病理学表现;同时采用SP免疫组织化学法检测各组病变组织中TGF-β1的表达情况;后采用RT-PCR技术比较各组TGF-β1,miR-29基因的表达.结果:HE染色结果显示Ctrl组、Sham组、UUO组、VAN组及TMP组的肾间质损伤评分分别为0.27±0.10,0.30±0.12,8.79±1.03,6.23±0.81及4.57±0.74.Masson染色胶原半定量分析结果显示Ctrl组、Sham组、UUO组、VAN组及TMP组的评分分别为0.21±0.03,0.23±0.06,2.49±0.33,1.63±0.07及1.32±0.04.SP免疫组织化学染色显示模型组TGF-β1的蛋白表达高于对照组;而缬沙坦和TMP可部分逆转TGF-β1蛋白的表达,且TMP的效果优于缬沙坦.RT-PCR结果显示模型组的TGF-β1 mRNA表达增高、miR-29 mRNA表达降低.TMP组和缬沙坦组TGF-β1 mRNA表达明显低于模型组,而miR-29 mRNA表达则明显高于模型组;且TMP 组TGF-β1 mRNA表达高于缬沙坦组.结论:缬沙坦和TMP可明显减轻UUO致RIF中肾组织学损伤,且TMP的疗效优于缬沙坦.此外TMP还可抑制TGF-β1而促进miR-29的表达.
